Efeito da rLCAT no metabolismo de lipoproteínas em ratos

EFFECT OF RECOMBINANT
HUMAN LECITHIN
CHOLESTEROL
ACYLTRANSFERASE
INFUSION ON LIPOPROTEIN
METABOLISM IN MICE
X a v i e r Ro u s s e t , B o r i s Va i s m a n , B r u c e A u e r b a c h , B r i a n R.
K r a u s e , Re y n H o m a n , J o h n S t o n i k , G y o rg y C s a ko , Ro b e r t
S h a m b u re k a n d A l a n T. Re m a l e y

THE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL
THERAPEUTICS
Received April 26, 2010; accepted June 30, 2010

INTRODUÇÃO

 Defi ciência em Lecitina Colesterol∙Acil
Deficiência LCAT
Transferase (LCAT) familial (FLD)

∙ Fish eye Disease
(FED)
Baixos níveis de Presença anormal de high-density Lipoproteína X (Lp-X) lipoprotein (HDL)
Contribui para o estágio final da doença renal

FUNÇÃO DA ENZIMA

OBJETIVO

Testar a possibilidade de usar a rLCAT como terapia enzimática

RESULTADOS

EFEITO DA INJEÇÃO DE PLASMA DE
RATINHOS LCAT-TG EM LCAT-KO

Perfil lipoproteico de ratinhos após injeção de plasma
A – P. L. de ratinhos LCAT-KO não tratados

B – P.L. de ratinhos LCAT-KO tratados com plasma inativado

C – P.L. de ratinhos LCAT-KO tratados com plasma fresco

PRODUÇÃO E CARATERIZAÇÃO DE
R LCAT
Produção
em células HEK

Purificação
Análise por eletroforese SDS em gel de poliacrilamida; corada com Coomassie
Blue-R250

EFEITO IN VITRO DA R LCAT EM
LIPOPROTEÍNAS

Análise por eletroforese após tratamento com rLCAT

 Adição de rLCAT soro de controlo – tanto na presença como ausência de apoA-I exógena - leva a uma mudança da posição β para uma forma de mais rápida migração;
 No soro de um paciente FLD, havia lipoproteínas residuais aprisionadas na origem e bandas de migração lenta na região β; após tratamento, detetadas bandas na zona α.

Efeito da incubação de rLCAT com soro FLD nos níveis de lípidos Conclui-se que há transferência de colesterol de outras lipoproteínas para o HDL após incubação in vitro com rLCAT.

INVESTIGAÇÃO DE DIFERENTES