Ed de princípios básicos de dna recombinante

Estudo dirigido – Biologia Celular –Princípios básicos de Tecnologia de DNA recombinante.

1) O que é a tecnologia de DNA recombinante?

R: Tecnologia de DNA recombinante é o conjunto de técnicas utilizadas para se modificar uma sequencia de DNA, utilizando-se enzimas de restrição, ligases e vetores de clonagem para tais técnicas.

2) O que é um plasmídeo? Quais as principais diferenças entre um plasmídeo e um cromossomo?

R: Plasmídeo é uma sequencia de DNA circular capaz de se reproduzir independentemente do DNA cromossômico, presente principalmente nas células bacterianas. O plasmídeo, em relação ao DNA cromossômico, é muito menor, e pode, diferentemente deste, ser transmitido a outras bactérias através da conjugação.

3) Cite e explique três características essenciais de um vetor de clonagem (por ex., plasmídeo).

R: um vetor de clonagem deve possuir sítios de sequencias palindrômicas para reconhecimento de enzimas de retrição, permitindo assim a inserção de genes de interesse, um marcador que permita a seleção da célula, como por exemplo um gene relativo à resistência de alguma droga; e uma origem de replicação, para que o vetor possa ser multiplicado e proliferado.

4) O que são e como agem enzimas de restrição?

R: Enzimas de restrição são proteínas que clivam o DNA em sítios específicos, reconhecendo esses sítios, zonas de sequencia palindrômica na dupla-fita de DNA, e promovendo o corte do material genético.

5) Qual(is) das sequências abaixo você esperaria que fosse um sítio de reconhecimento para uma enzima de restrição ? Por quê? TGCCGT ----- TGCGCA ----- TGCTGC

R: TGCGCA, porque é uma sequencia palindrômica, ou seja, uma sequencia que é igual ao inverso de sua fita complementar, tal tipo de sequencia é o reconhecido pelas enzimas de restrição.

6) Você clonou um cDNA que codifica para um hormônio humano, e você deseja produzir esse hormônio em uma bactéria de maneira a