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DISCUSSÃO
No presente trabalho o papel funcional da PLD2 em diferentes processos celulares foi estudado utilizando as células da linhagem de mastócitos RBL-2H3, estavelmente transfectadas para a super expressão de PLD2 catalítica ativa (células CA) ou catalítica inativa
(células CI). As células CI apresentam alterações morfológicas que envolvem o aparelho de
Golgi e a distribuição de microtúbulos. Nestas células o aparelho de Golgi se encontra espalhado ocupando uma área maior do citoplasma. Estas células, quando estimuladas, apresentam microtúbulos desorganizados. Nossos dados mostram que a PLD2 está envolvida na manutenção do aparelho de Golgi e da estrutura celular.
Os resultados deste estudo mostram que a PLD2 está localizada no citoplasma, sendo abundante na região justanuclear, principalmente das células CI, o que indica uma colocalização com o aparelho de Golgi. A imunomarcação destas células realizada em nosso laboratório com um outro anticorpo anti-PLD2 (cedido pelo Dr. Dennis Sheilds, Departments of Developmental and Molecular Biology and Anatomy and Structural Biology, Albert
Einstein College of Medicine, Bronx, New York) mostra uma localização desta proteína estritamente no aparelho de Golgi. Isto sugere que este anticorpo tem maior afinidade para a
PLD2 associada ao aparelho de Golgi. As publicações do laboratório do Dr. Dennis Sheilds mostram que a PLD2 foi localizada em associação com cisternas e vesículas do aparelho de
Golgi em células endócrinas (Freyberg et al., 2002).
Nossas observações mostram que nas células CI o aparelho de Golgi está disperso pelo citoplasma. A incubação com o 1-Butanol, que bloqueia a produção de PA pela PLD, também resulta na desorganização estrutural do aparelho de Golgi nas linhagens CA, VET e RBL2H3, que passam a apresentar o fenótipo das células CI. Estes resultados sugerem que a produção de PA pela PLD2 pode ser importante para a manutenção estrutural do aparelho de
Golgi. O PA possui um papel