Diagnóstico tuberculose

Protocolo Antibiogramas MGIT

( Kit Bactec MGIT 960 SIRE

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( Tubos BBL MGIT de 7 mL e BBL MGIT PZA

Kit Bactec MGIT SIRE

• Frascos reconstituídos com 4 mL de Água destilada, estéril e desionizada. Concentrações: INH( 8.3 µg/mL, Conc final: 0.1μg/mL RMP( 83 µg/mL, Conc final: 1.0 μg/mL STR ( 83 µg/mL, Conc final: 1.0 μg/mL EMB( 415 µg/mL, Conc final: 5.0 μg/mL Kit Bactec MGIT PZA • Frasco reconstituído com 2,5 mL de Água destilada, estéril e desionizada. PZA ( 20000 µg, Conc. Final: 8000µg/mL

o Os antibióticos, uma vez reconstituídos, podem ser divididos em alíquotas e ser conservadas a – 20 ºC até 6 meses.

I) Preparação da amostra a partir de um tubo MGIT positivo

( Dia seguinte: Dia 1 ou Dia 2 ( Dia 3 a Dia 5: Diluição de 1:5 (1mL do tubo MGIT em 4 mL de soro fisiológico estéril)

II) Preparação da amostra a partir do meio sólido

( Com uma ansa estéril retirar da cultura tantas colónias quanto possível até obter uma suspensão de 1 de McFarland; ( Deixar repousar / sedimentar a suspensão durante 20 minutos; ( Transferir o sobrenadante para outro tubo estéril vazio e ajustar a suspensão a 0,5 de McFarland; ( Diluir 1 mL desta suspensão a 0,5 de McFarland, em 4mL de soro fisiológico estéril (diluição 1:5) (1)

III) Preparação dos tubos para Antibiograma

1- Rotular os tubos MGIT de 7mL que sejam necessários para o antibiograma pela ordem: CC; S; I; R; E; 2- Rotular os tubos PZA de 7 ml: CC e PZA 3- Adicionar assepticamente 0,8 mL de suplemento Bactec MGIT 960 SIRE, e 0.8mL do suplemento Bactec MGIT PZA; 4- Adicionar assépticamente 100 µL de cada antibiótico ao tubo correspondente.

IV) Preparação do