Diagnostico de doenças atraves da PCR

Diagnóstico de doenças através da PCR
As limitações na sensibilidade e especificidade dos testes laboratoriais parasitológicos e sorológicos, especialmente quando se trata do diagnóstico de fase crônica, explicam o interesse e a necessidade de implantação de um método direto e mais sensível que permita monitorar a presença do parasito e confirmar a etiologia da doença.
DIAGNÓSTICO DO PROTOZOÁRIO
Trypanosoma cruzi
A principal técnica que tem sido testada para a pesquisa do parasita, T. cruzi, diretamente no sangue de pacientes crônicos é o ensaio molecular por PCR, baseado no emprego de oligonucleotídeos sintéticos que amplificam seqüências de DNA específicas de T. cruzi (MARCON, 2001). Os estudos de biologia molecular estão sendo empregados tanto em testes confirmatórios para doença de Chagas, bem como,para o acompanhamento do paciente chagásico crônico. São vários os iniciadores registrados no GenBank que poderiam ser utilizados como base para as reações de PCR(GILBER, 2007).Baseando-se na técnica de PCR, é feita a amplificação de fragmentos oriundos do DNA genômico de T. cruzi ou do DNA de minicírculos do cinetoplasto do parasito (k-DNA). Este é um procedimento a ser empregadas em amostras de sangue de pacientes chagásicos e/ou fezes de triatomíneos, ou em outros materiais biológicos, detectando-se o DNA de um único parasita ou frações do mesmo, com ausência de reações cruzadas. Em estudos de monitoramento terapêutico com testes periódicos e sistemáticos dos indivíduos, recomenda-se a utilização de técnica molecular associada à sorologia (GILBER, 2007). A reação de PCR constitui-se em um instrumento diagnóstico valioso, notadamente no caso de doenças infecciosas graves, devido à sua capacidade em detectar agentes infecciosos com maior sensibilidade e especificidade (BRAZ, 2006), sem necessidade de se encontrarem parasitas viáveis na amostra biológica. Para os recém-natos o diagnóstico rápido é essencial para a introdução precoce do tratamento