Cultura de células animais

Páginas: 5 (1231 palavras) Publicado: 3 de junho de 2013
Cultura de células animais é um processo através do qual células animais são cultivadas sob condições controladas, geralmente 37ºC e atmosfera úmida com 5% CO2. Essa técnica tornou-se um procedimento laboratorial rotineiro na década de 50, de modo que atualmente é possível isolar e cultivar células de diferentes tecidos e formas. As culturas de células que são isoladas diretamente de um organismosão denominadas de culturas de células primárias, as quais são caracterizadas por um período de vida médio limitado. Uma vez que essas células entram em senescência após um certo número de duplicações, muitas pesquisas são desenvolvidas com células imortalizadas, que distinguem-se das primárias pela sua capacidade de se proliferar indefinidamente, o que é geralmente alcançado pela transdução degenes ou vírus que levam a desregulação do ciclo celular.
Dadas as condições apropriadas, a maior parte das células vegetais e animais poderão viver, multiplicar-se e até mesmo expressar propriedades diferenciadas em uma placa de cultura de tecidos. As células podem ser observadas sob o microscópio ou analisadas bioquimicamente, e os efeitos da adição ou remoção de moléculas específicas, taiscomo hormônios ou fatores de crescimento podem ser explorados. Além do mais, em uma cultura mista, as interações entre os vários tipos de células podem ser estudadas. Experimentos com células oriundas de cultura são, às vezes, ditos como tendo sido conduzidos in vitro para contrastá-los daqueles experimentos com organismos intactos, os quais são referidos como conduzidos in vivo. Os termos podem serconfusos porque são freqüentemente utilizados com sentidos diferentes por bioquímicos, para quem in vitro é aplicado para reações bioquímicas que ocorrem fora da célula viva, enquanto in vivo é aplicado para qualquer reação que ocorra dentro de uma célula viva.
A cultura de tecidos começou, em 1907, com um experimento designado para resolver uma controvérsia em neurobiologia. A hipótese examinadaera conhecida como doutrina do neurônio, que estabelece que cada fibra nervosa é o produto de uma única célula nervosa e não o produto da fusão de muitas células. Para testar esta controvérsia, pequenos pedaços da medula espinhal foram colocados sobre fluidos de tecido coagulado em uma câmara úmida e morna, e observados ao microscópio a intervalos regulares de tempo. Após um ou mais dias, célulasnervosas individuais puderam ser vistas alongando-se para dentro do coágulo. Assim a doutrina do neurônio foi confirmada, e as bases para a revolução da cultura de células foram assentadas.
Os experimentos originais, em 1907, envolveram a cultura de fragmentos pequenos de tecidos, ou explantes. Atualmente, culturas são mais comumente feitas a partir de suspensão de células dissociadas detecidos, como já descrito. Ao contrário das bactérias, a maior parte das células de tecidos não estão adaptadas para viverem em suspensão e necessitam de uma superfície sólida para crescerem e dividirem-se, que é agora usualmente a superfície plástica de uma placa de cultura de tecidos. Entretanto, as células variam em seus requerimentos, e algumas não crescerão ou se diferenciarão a menos que a placaseja coberta com componentes específicos da matriz extracelular, tais como colágeno ou laminina.
Culturas preparadas diretamente de tecidos de um organismo, com ou sem um passo inicial de fracionamento das células, são chamadas culturas primárias, como já dissemos. Na maioria dos casos, células em culturas primárias podem ser retiradas da placa de cultura e usadas para formar um número razoável deculturas secundárias; elas podem ser repetidamente subcultivadas desta forma, por semanas ou meses. Tais células apresentam freqüentemente muitas propriedades diferenciadas apropriadas a sua origem: fibroblastos continuam a secretar colágeno; células derivadas de músculo esquelético embrionário fusionam-se para formar fibras musculares gigantes, que contraem espontaneamente na placa de cultura;...
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