Cromatografia para extração da clorofila

Introdução:

A cromatografia, técnica utilizada nesse experimento, tem por finalidade a identificação de substancias, separação e purificação de misturas usando propriedades relacionadas com a cor e a polaridade dos compostos. Utilizando um eluente razoavelmente polar, separa-se as misturas de maneira que, o composto menos polarizado tende a ser recolhido primeiro e então sucessivamente até o mais polar. Após usar a coluna de sílica que separa os compostos, para a caracterização, utilizasse uma placa de vidro coberta por uma fina camada de oxido de silício, onde deposita-se uma ínfima quantidade aplicada pontualmente do extrato para análise da efetividade da separação dos compostos. Ao subir pela placa por capilaridade, o eluente carrega parte das substancias separadas, essas vão se depositando e conforme sua interação com a sílica diminui, formam pontos. Dessa forma, as colunas que tiverem mais de um ponto não possuem somente um composto, e os que tiverem a mesma substancia, apresentarão pontos alinhados entre as colunas, conforme anexo 1. Também pode-se utilizar do método do Ultra-violeta para análise das bandas de absorção das substancias separadas, a fim de caracterizá-las. O objetivo da experiência era extrair da alga *spirilina máxima* a clorofila a (figura 2) dos compostos xantofila e caroteno.

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL: Pesou-se 10g de sílica em gel em um béquer de 100ml. Em seguida, adicionou-se em um erlenmeyer 100ml de uma mistura de hexano/acetato de etila na proporção de 8:2, parte dessa mistura foi adicionado no bequer com sílica e agitando-se com um bastão de vidro para a formação de uma suspensão. Em um suporte, fixou-se uma coluna cromatográfica verticalmente, introduzindo-se um pouco de algodão para que esse tampasse a saída inferior. Nele adicionou-se a suspensão de eluente e sílica em gel, deixando a sílica assentar-se com o auxilio de delicadas batidas no vidro da coluna. Nunca deixou-se a coluna sem excesso