Ciclo de krebs

UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO
CENTRO ACADÊMICO DE VITÓRIA
DISCIPLINA DE BIOQUÍMICA

AULAS PRÁTICAS DE BIOQUÍMICA

Professores: César Andrade
Carmem Burgos
Emerson Peter

Vitória de Santo Antão - 2007

Aulas práticas da disciplina de bioquímica – CAV/UFPE___________________________________________________

AMINOÁCIDOS

1. Reação do Biureto

Reação geral para proteínas.
Esta reação é denominada “do biureto” porque um composto chamado biureto é o mais simples que apresenta este teste positivo. O biureto é obtido pelo aquecimento da uréia de acordo com a seguinte reação:

O biureto reage em meio alcalino com um sal de cobre produzindo um composto de cor violeta.

A reação do biureto é positiva com compostos que contém duas ligações amida, unidas diretamente, ou por meio de átomo de carbono intermediário.

Em outras palavras, para que a reação seja positiva, há necessidade de que o composto contenha pelo menos 2 ligações peptídicas. Nestas condições nem a maioria dos aminoácidos nem os dipeptídeos, respondem positivamente a esta reação. Como um

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tripeptídeo possui 2 ligações peptídicas eles são biureto positivos. O mesmo ocorre com as proteínas que tem inúmeras ligações peptídicas. Esta reação é também usada para determinação quantitativa de proteínas em líquido biológico (p.ex.sangue).

Acredita-se que o composto corado resulta de um complexo entre o íon cúprico e o grupo CO-NH, estável em meio alcalino.

TÉCNICA

Marcar 2 tubos de ensaio e colocar em cada um 2mL do reativo do biureto (sal de cobre em meio alcalino).

Ao número 1 – Juntar 1 mL de água destilada (tubo controle).
Misturar por leve agitação dos tubos, anotar os resultados.

2. Reação Xantoprotéica (pesquisa de tirosina e triptófano)

Esta reação é positiva com compostos portadores de radicais aromáticos substituídos. Nas proteínas estes