Carol

Relatório de Biologia Ana Carolina Jesus nº2 12ºB Tema: ADN Assunto: Identificação de um criminoso por perfil de ADN

Introdução:

Procedimento:
 Adicionou-se 7,5 µL da mistura de enzimas a cada amostra.

Fig nº1:Adicionamento de enzimas.

 Fechou-se os microtubos e misturou-se os componentes agitando ligeiramente com os dedos.  Colocou-se as amostras num suporte flutuador e incuba-as num banho-maria a 37ºC durante 30 minutos.  Mediu-se 60 ml de TBE numa proveta e adiciona ao balão de Erlenmeyer que contem a agarose já pesada.

Fig nº2: Componentes (TBE e Agarose) e provetas.

 Aqueceu-se a solução durante 1 minuto até dissolver completamente a agarose.

 Retirou-se o balão Erlenmeyer do microondas e deixou-se arrefecer durante 10 minutos.

Fig nº3: Diogo a retirar o Erlenmeyer do microondas.

 Selou-se os topos do tabuleiro do gel com fita adesiva.

Fig nº4: Colocação de fita adesiva no tabuleiro de gel.

 Colocou-se o pente de plástico numa extremidade do tabuleiro.

Fig nº5: Tabuleiro de gel com pente de plástico

 Adicionou-se 33 µL de 500x Fast Blast DNA stain à agarose.

Fig nº6: Fast Blast DNA + agorose

 Despejou-se a agarose no tabuleiro do gel, cuidadosamente para não se formarem bolhas de ar.

Fig nº7: tabuleiro de gel com a agarose (piscina)

 Deixou-se o gel solidificar durante 15 minutos.  Depois de solidificado, removeu-se cuidadosamente a fita adesiva e o pente do gel.  Colocou-se o tabuleiro do gel dentro da tina de electroforese.  Numa proveta preparou-se uma solução de TBE e Fast Blast DNA stain (167 µL para 250 mL de TBE)

 Encheu-se a tina com a solução anterior, despejando-a nas câmaras laterais.

Fig nº8: Adição do TBE+Flast Blast DNA

 Carregou-se o gel com 15 µL de amostra em cada poço.

Fig nª9: Preenchimento dos poços com cada amostra

 Colocou-se cuidadosamente a tampa na tina.

Fig nº10: Tina com tampa

 Ligou-se o cabo vermelho ao terminal vermelho e o cabo preto