biotecnologia

Engineering of Therapeutic Proteins production in Escherichia coli

Andreia Martins, nº29532
Clara Godinho, nº 29487
Vânia Pais, nº 29406

Orientador: Prof. Ana Cristina Dias Cabral

Covilhã, Novembro de 2011

•Engenharia da produção de proteínas terapêuticas pela Escherichia coli.
• Técnica do DNA recombinante

baixo custo
Escherichia coli

facilidade de cultivo

insulina

Diabetes

Produção em larga escala
Vectores

Produção de proteínas terapêuticas

Novo patamar a nível da saúde e da investigação
Desenvolvimento de biofármacos.

Neste trabalho:
• Descrever o processo de formação de algumas destas proteínas,
• Alguns dos problemas que são encontrados na sua conceção,
• Modo como esses problemas são contornados.

Sistemas de expressão das bactérias  incapazes de produzir modificações pós-traducionais nas proteínas (como a glicolisação).

Vírus

Alternativa?

Células de mamíferos Leveduras

o baixo custo simplicidade de cultivo de bactérias

Imbatíveis
VANTAGENS
E.coli é sempre
PREFERÍVEL

falta de algumas modificações pós-traducionais em células bacterianas ultrapassada

engenharia de proteínas

Modificações póstraducionais Construção
“limpa”

Estabilidade da proteína

Engenharia de proteínas

Fusão de proteínas Solubilidade da proteína

Ação biológica das proteínas Glicosilação

Modificação das proteínas após a síntese
Muitas proteínas emergem do ribossoma prontas para funcionar
Outras, no entanto, sofrem uma série de modificações pós-tradução (como a glicosilação) O-glicosilação
Ligação de resíduos de carboidratos em ligação O-glicosídica
(resíduos de Thr ou Ser): ocorre somente no complexo de
Golgi, com a cadeia polipeptídica já pronta

Tipos de glicosilação
(adição de sacarídeos a cadeias proteícas) N-glicosilação
Ligação de resíduos de carboidratos em ligação N-glicosídica
(resíduos Asn): é iniciada no retículo endoplasmático