Bioquimica

UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA – CAMPUS FLORESTAL
ENGENHARIA DE ALIMENTOS

prática número 05: Extração e identificação de ácidos nucléicos

Docente:David Henrique Rodrigues
Bianca Marise,801
Bruna Paloma ,767
Rita de Cássia,792
Marcos Antônio,788

Florestal
2012

INTRODUÇÃO
Podem ser encontrados nas células dois tipos de ácidos nucléicos, que apresentam uma função definida na transmissão dos caracteres hereditários. O RNA (ácido ribonucléico) e o DNA (ácido desoxirribonucléico) são polímeros de nucleotídeos, formados por três unidades simples: base nitrogenada (que pode ser púrica ou pirimídica), uma pentose e fosfato.
No isolamento dos ácidos nucléicos é necessário destruir as membranas celulares e subcelulares para que possa libera-los e pela desnaturação protéica ocorre a sua separação do complexo DNA-proteína. Em seguida, os ácidos nucléicos são precipitados com o ácido tricloroacético (TCA) a 20%, junto com as proteínas e posteriormente, o extraído reagem com o TCA a 5% a quente.
Para detectar o DNA, deve ocorrer uma reação entre a difenilamina com a 2-desoxirribose, já o RNA é determinado pela reação do orcinol com a ribose.

OBJETIVO

Preparar um extrato celular e explicar a função dos reagentes utilizados.
Aprender a utilizar uma centrífuga.
Explicar as reações para identificação de ácidos nucléicos;

MATERIAIS e REAGENTES

• Tubos de ensaio. • Pipetas. • Gral e pistilo refrigerado. • Centrífuga de bancada. • Tubos de centrífuga. • Bastão de vidro. • Béquer. • Erlenmeyer. • Pinça • Almofariz • Bastão de Vidro.

• Água destilada. • Fermento biológico. • Éter etílico. • Ácido tricloroacético (TCA) a 20% e 5%.