bioquimica

Reação do biureto

Biureto é o nome dado à estrutura originada a partir da decomposição da uréia, quando essa é submetida a uma temperatura de, aproximadamente, 180oC:

Soluções alcalinas que contenham biureto desenvolvem uma coloração violeta, quando em presença de sulfato de cobre (CUSO4). Esse fenômeno deve-se à formação de um complexo entre o íon Cu2+ e os átomos de nitrogênio presentes na molécula do biureto. O esquema abaixo representa um modelo da formação desse complexo:

Interação biureto / Cu2+

Se fizermos uma boa observação, veremos que as ligações existentes na molécula de biureto são muito parecidas com as ligações peptídicas estabelecidas entre os aminoácidos durante a formação de peptídeos e, finalmente, das proteínas.

Observe o esquema abaixo, que representa a interação entre as ligações peptídicas de uma proteína ou peptídeo com íons Cu2+: Assim, a reação de peptídeos e proteínas com o sulfato de cobre recebeu o nome de Teste do Biureto, e é utilizada para pesquisa de ligações peptídicas.

Interação ligação peptídica / Cu2+

a.1. Material

a) Reagentes e soluções

- reagente de biureto * - solução de ovoalbumina 2% - solução de glicina 0,1% - solução de cistina 1% - água destilada - solução de amostra desconhecida b) Vidraria e instrumental - 05 tubos de ensaio
- pipetas de 2 mL (plásticas ou de vidro)
- conta-gotas ou pipeta Pasteur

* Preparo do reagente de biureto: dissolva 1,5g de sulfato de cobre (CuSO4 . 5H2O) e 6,0g de tartarato duplo de sódio e potássio (KNaC4H4O6 . 4H2O) em 500 mL de água destilada. Adicione, sob agitação constante, 300 mL de solução de NaOH 10%. Adicione 1g de iodeto de potássio (KI). Complete o volume para 1L com água destilada e guarde o reagente em frasco âmbar. Esse reagente conserva-se por tempo indefinido.

a.2. Procedimento

1. Numerar os tubos de ensaio e preparar a seguinte bateria: