Bact Rias Do Grupo Coliforme

Bactérias do grupo coliforme
Material utilizado em bacteriologia: autoclave; estufa bacteriológica; estufa de esterilização e secagem; balança; destilador; banho-maria; contador de colônias; alça de platina com cabo; tubo de Durhan; tubo de ensaio; algodão em rama; meios de cultura; frascos de coleta; pipetas graduadas; papel-alumínio; lamparina a álcool ou bico de Bunsen; placas de Petri; pinça de aço inox; membranas filtrantes; porta-filtro de vidro ou aço inox; lâmpada ultravioleta.
Preparo do material de vidro
Tubos de ensaio
a) colocar o tubo de Durhan na posição invertida dentro do tubo de ensaio;
b) tampar o tubo de ensaio com um chumaço de algodão em rama.
Frascos de coleta
a) colocar duas gotas (0,1 ml) de Tiossulfato de Sódio a 10% dentro do frasco;
b) colocar uma tira de papel-alumínio entre a boca e a tampa do frasco;
c) envolver a boca e tampa do frasco em papel-alumínio.
Pipetas
a) colocar um pequeno chumaço de algodão no bocal da pipeta;
b) envolvê-la em papel-alumínio ou papel-madeira (Kraft).
Placas de petri de vidro
a) envolvê-las em papel-alumínio ou papel-madeira.
Meios de cultura caldo lactosado; caldo lactosado verde brilhante Bile a 2%; caldo EC; Plate Count Agar
Preparação dos meios de cultura
Caldo lactosado de concentração dupla
a) pesar 26 gramas do meio de cultura e dissolver em 1.000 ml de água destilada;
b) distribuir em tubos de ensaio (10 ml em cada tubo), tampar os tubos;
c) esterilizar a 121º C (1 Kg/cm2 de pressão) em autoclave durante 15 minutos;
d) deixar esfriar;
e) guardar no refrigerador (válido por uma semana).
Caldo lactosado de concentração simples
Pesar 13 gramas do meio de cultura desidratado e dissolver em 1.000 ml de água destilada; distribuir em tubos de ensaio (10 ml em cada tubo), tampar os tubos; esterilizar a 121º C (1 Kg/cm2 de pressão) em autoclave durante 15 min; deixar esfriar; guardar no refrigerador (válido por uma semana).
Caldo lactosado verde brilhante bile a 2%
Pesar 40 gramas do meio de cultura