Aula Pratica de Citogenetica

A primeira aula em laboratório da disciplina de Introdução a Citogenética obteve-se a preparação de lâminas e a visualização de células das raízes de cebola em microscópio óptico para observação e reconhecimento das fases da mitose.

1º passo:
Preparação das raízes da cebola:
- Aparar as raízes velhas, pois estimula que as raízes cresçam;
- Colocar no copo com água, uma cebola de maneira que apenas a parte inferior do bulbo toque a água.
- Deixar esquecida por 3 a 4 dias em um lugar sem luz.

2º Passo:
- Depois dos dias de descanso, a raiz deve encontra-se grande.

3º passo:
- Cortam as raízes e coloca-se no fixador, no mínimo 2 horas.
Fixador é feito com 3 partes de álcool absoluto e 1 parte de acido acético. Vai servir para paralisa o metabolismo celular e preserva as estruturas do tecido para os tratamentos posteriores.

3 partes de álcool absoluto

1 parte de acido acético

4º passo: Hidrolise das raízes:
- colocar o material em HCL 1 N, 60ºC durante 2 minutos em Banho Maria.

5º passo:
Preparação da lâmina:
- Coloca a lâmina e a raiz com o auxílio de uma pinça, em cima de uma barra de gelo (para quebrar o calor da raiz a 60ºC, pois assim ela não vai continuar desmanchando);
- Corta a ponta da raiz da cebola com um bisturi (a mitose estar na ponta, na parte mais branca), e depois macera a ponta da raiz;
- Limpa com o papel para retirar o excesso do HCL na lâmina;
- Coloca uma gota Orceína sobre a lâmina ( orceína funciona como fixador e como corante);
- Coloca a lamínula sobre a lâmina com o material genético;
- Coloca o papel toalha por cima da lâmina quase pronta;
- Pressiona com o dedo polegar por cima do papel toalha( esquech), para fixar a Lamínula sobre a Lâmina, para retirada do excesso de liquido.

6º passo:
- Coloca a Lâmina no microscópio óptico e observa as fases da Mitose.

Resultado
Observei na minha lâmina, apenas a fase Prófase e Anáfase da Mitose.