Aula 5 Enzimas Cin Tica

Fundamentos da cinética enzimática
Estudo da velocidade das reações catalisadas por enzimas

Equilíbrio atividades enzimáticas é fundamental para a homeostase! Teoria geral da ação enzimática
Michaelis & Menten
(1913)

A [Substrato] afeta a velocidade das reações enzimáticas

Hipótese do rápido equilíbrio

1ª etapa
Enzima combina-se de modo reversível com o substrato, formando um complexo E-S

E+S

K1

A associação e a desassociação é muito rápida no equilíbrio

K1 = [E][S]

ES

K-1

K-1 = [ES]
Ks - constante de dissociação do ES

Ks = [E][S]/[ES] = k-1/k1

2ª etapa

Hipótese do estado estacionário

O E-S é rompido, formando o Produto
(P) e a liberação da enzima (E)

ES

K2

E+P

K- 2

A [ES] permanece constante ao longo do tempo

E+S

K1
K-1

K2

ES

E+P
K- 2

Cinética enzimática:
Reação é mais lenta, e a velocidade total da reação deve ser proporcional à [ES]

 [S]
 Velocidade inicial - V0
Velocidade máxima - Vmáx

Efeito da [S] sobre a velocidade de uma reação

A determinação de V0 reflete o estado estacionário
[ES] constante por um período

A Vmáx ocorre quando quase toda a enzima estiver presente como complexo ES e [E] é desprezível
Nessas condições, a E está “saturada” com o S, um aumento de [S] não provoca efeito na velocidade
(platô no gráfico)

Cinética de saturação

Constante de Michaelis-Menten
(unidade de concentração)

A curva que expressa a relação entre [S] e V0 tem a mesma forma geral para a maioria das enzimas

(curva hiperbólica) Cinética de Michaelis-Menten

Km = K-1 + K2/K1

Quanto menor maior afinidade pelo substrato

Km é uma medida da afinidade da enzima pelo substrato

... Se uma enzima tem um valor pequeno de Km , atingirá a for o Kela m eficiência máxima da enzima catalítica em baixas [S]

Quanto maior for o Km menor afinidade da enzima pelo substrato

Exemplos - Km

Hexoquinase (cérebro) - 0,05mM
Β-galactosidase (lactose) – 4,0 mM

Equação de Michaelis-Menten

Expressão quantitativa da relação entre a [S] e a velocidade da