Apresentação da tecnologia do dna recombinante
Cindy Vilas Boas - 11015411 Jordana Carnicelli - 11126011
Tópicos
1. Dogma Central da Biologia Molecular 2. Algumas técnicas que compõem a tecnologia do DNA Recombinante 3. Um pouco sobre bactérias 4. A tecnologia do DNA Recombinante 5. Importância, aplicações e implicações éticas
Dogma Central da Biologia Molecular
Importante: há contradições: • O RNA pode sofrer replicação em alguns vírus e plantas; • O RNA viral, através de uma enzima denominada transcriptase reversa, pode ser transcrito em DNA.
Algumas técnicas que compõem a tecnologia do DNA Recombinante
• Enzimas de restrição: tesouras biológicas • Eletroforese em gel: separação de fragmentos de DNA
Bactérias e seus plasmídeos
A Tecnologia do DNA Recombinante
• O que é? Um conjunto de técnicas que visa o estudo de um gene. A técnica central é a clonagem molecular. • Por que falar do dogma central da biologia molecular? Porque quando se estuda um gene, se estuda a proteína que ele codifica.
A Tecnologia do DNA Recombinante
• Clonagem molecular:
• Inserto + vetor ~> DNA recombinante • Processo da transformação
• Tipos de vetores:
• Plasmídeos • Bacteriófago Lâmbda • Cosmídeos • Vírus
A Tecnologia do DNA Recombinante
Sobre os vetores:
• Plasmídeos: pequenos fragmentos de DNA. • Fagos ƛ : parasitas obrigatórios da E. Coli. Fragmentos maiores de DNA. • Cosmídeos: híbrido dos 2 anteriores. Possui vantagens de ambos. • Vírus: variam muito do tipo usado.
A Tecnologia do DNA Recombinante
Supondo que eu queira estudar um gene que codifica uma proteína que eu não conheço, o que fazer? 1º Recorto o gene por enzimas de restrição 2º Clivo o plasmídeo com a mesma enzima usada na 1ª etapa 3º Plasmídeo clivado + fragmentos contendo o gene + enzima ligase ~> DNA recombinante 4º Insiro o DNA recombinante em uma bactéria hospedeira, processo denominado transformação 5º Divisão celular ~> milhares de cópias do DNA Recombinante
DNA de interesse