Apostila de laboratório de bioquimica da licenciatura em ciências exatas

Páginas: 11 (2519 palavras) Publicado: 24 de março de 2012
PRÁTICA 1


DETERMINAÇÃO DE PONTO DE FUSÃO E SOLUBILIDADE DE DOIS AMINOÁCIDOS


I. Materiais e equipamento a ser utilizados

- 2-tubos de Thielle; - 2 suportes com garras;
- termômetro; - vidro de relógio ou tubinho de vidro
- tubos capilares de vidro, - elástico de látex
- tubo de vidro comprido - espectrofotômetro no ultravioleta
- espátulapequena - 4 tubos de ensaio médios
- nujol;

II. Procedimentos


A) Determinação de ponto de fusão


1. Pulverizar uma pequena porção de do aminoácido em um almofariz, se estiver em blocos duros.
2. Fechar uma das extremidades do capilar no bico de Bunsen se estiver aberta.
3. Introduzir o aminoácido no capilar, compactando-o. Proceder a compactação da amostra, deixando ocapilar cair por uma vareta de vidro. Esta operação deverá ser repetida tantas vezes quantas forem necessárias, para que se tenha compactado, no capilar, aproximadamente 1 cm da substância.
4. Prender, através de anel de látex, o capilar ao termômetro, de tal forma que a parte que contém a amostra fique junto ao bulbo do mesmo.
5. Montar a aparelhagem ao lado, utilizando como banho Glicerina.
6.Aquecer o tubo de Thielle lentamente, deslizando a chama sobre a parte lateral inferior do mesmo.
7. Observar cuidadosamente até o ponto de fusão e anotá-lo.



B) Determinação de solubilidade

1. Adicionar em um tubo de ensaio cerca de 2mL de água destilada e uma ponta de espátula da de uma das amostras de aminoácido e observe a sua solubilização. Repita o mesmo procedimento com a outraamostra.
2. Com as duas soluções diluídas no item anterior tire um espectro no espectrofotômetro de ultravioleta na região entre 220-300nm.

III. Questões


1. Quais os aminoácidos existentes na tua amostra?? Justifique.


2. Existe outro processo físico-químico para determinar os aminoácidos? Explique.


3. Quais experimentos você utilizaria para caracterizar rapidamente os aminoácidos?Explique.



PRÁTICA 2


DETERMINAÇÃO DE pKa DE UM AMINOÁCIDO


I. Soluções


A) preparadas

- NaOH: 250 mL de uma solução a 0,05 mol/L;
- HCl: 250 mL de uma solução a 0,05 mol/L;

B) a preparar

- ácido oxálico: 25,0 mL de uma solução a 0,1 mol/L;
- HOAc (ácido acético): 250,0 mL de uma solução a 0,1 mol/L;
- NH4OH: 250,0 mL de uma solução a0,1 mol/L;

C) Solução de Glicina a preparar


Preparar 50 mL de uma solução de Glicina a 0,1 mol/L e ajustar pH para 1,8, com HCl (3,0 mol/L).


II. Titulações


(a) ácido Oxálico (20,0mL) versus NaOH, faça titulação colorimétrica (3x)


(b) HCl (20,0mL) versus NaOH, faça titulação colorimétrica (3x)


(c) HCl versus NH4OH (20,0 mL), faça titulaçãopotenciométrica.


(d) NaOH versus HOAc (20 mL), faça titulação potenciométrica.


(e) NaOH versus Glicina (20 mL), faça titulação potenciométrica.


OBS.: 1. Calibre o pH-metro, ajustando primeiramente o pH 7,0 no botão "E" e depois o pH 4,0 no botão de sensibilidade.

2. As titulações potenciométricas devem ser realizadas de 0,5 em 0,5 mL.

3. Colocar em gráficotodos os dados das titulações potenciométricas e determinar os valores de pKas, para cada caso (pelo métodos das paralelas ou derivada primeira).

Montar os gráficos de titulação potenciométrica e determinar os valores de pKa!!!

III. Questões

1. Mostre aonde ocorrem os efeitos tampões nos gráficos e explique.
2. Os valores obtidos são correspondentes da literatura? Qual a diferença? Podemelhorar esses resultados? Como?
3. Explique por que existem as diferenças concentrações das soluções calculadas e experimentais?
4. O que é uma solução padrão? Quais são as suas propriedades? Neste experimento qual e a substância que se faz a solução padrão na titulação? Pode dar outros exemplos?

PRÁTICA 3


OBTENÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE CASEÍNA


I. Obtenção da Caseína


Pese...
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