2 Polimorfismo Gen Tico RFL RAPD SSR AFLP

Polimorfismo genético:
RFLP, RAPD, SSR, AFLP
Valeska Silva Lucena [e-mail] Introdução
Ao nível de DNA, uma única diferença de bases entre dois genes homólogos é suficiente para criar alelos.
Em muitos casos, uma única mudança de par de bases pode fazer um produto gênico diferir acentuadamente do produto normal.
Também podem haver um grande número de diferenças de um só par de bases dentro dos genes que não têm efeito nos produtos gênicos, e outros que ocorrem sem nenhuma consequência biológica, em segmentos de DNA que não codificam proteínas.

Marcadores Genéticos
Morfológicos

Bioquímicos

DNA

Marcadores Moleculares

Marcador Dominante e
Co-dominante
Marcador Dominante

aa

Aa

AA

Marcador Co-dominates

aa

Aa

AA

RFLP
(Restriction Fragment Length Polymorphism)

RFLP
• Polimorfismo de Comprimentos de Fragmentos de Restrição (obtidos por corte de fita dupla de DNA)
• Marcador baseado em hibridização de sequências de DNA

RFLP
• A lógica desta metodologia é a seguinte: as endonucleases de restrição cortam o DNA em sítios específicos de reconhecimento.
• Quando ocorre uma mudança em um único par de bases dentro de um sítio de reconhecimento, a sequência não é mais cortada RFLP
• Como consequência desta diferença elélica, são produzidos fragmentos de
DNA de tamanhos diferentes quando o
DNA é digerido com uma nuclease de restrição específica

RFLP
Consiste na análise de polimorfismo obtido através da digestão do DNA com enzimas de restrição. Os fragmentos são caracterizados pela hibridização com sondas específicas e separação por eletroforese.

RFLP
O que é uma sonda?
É um fragmento de DNA marcado (32P, biotina), utilizado para detectar moléculas de ácido nucléico com sequências complementares, por meio de hibridização.

O que é hibridização?
Pareamento de fitas complementares de DNA ou
RNA para produzir hélices duplas do tipo DNADNA ou DNA-RNA.

RFLP (procedimento)

RFLP (procedimento)

RFLP (procedimento)

Resultados de diferentes