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DISCUSSÃO

Diversos métodos podem ser utilizados para a fragmentação de uma cadeia polipeptídica. Enzimas denominadas proteases catalisam a quebra hidrolítica de ligações peptídicas. Algumas proteases rompem somente a ligação peptídica adjacente a resíduos de aminoácidos específicos e, assim, fragmentam um polipeptídio de uma forma reproduzível e previsível. Diversos reagentes químicos também rompem a ligação peptídica adjacente a resíduos específicos. ( LEHNINGER, 2011).

Na reação do biureto, o NaOH, presente em solução, conduz a cadeia peptídica a um desarranjo em sua estrutura tridimensional. Os íons Cu2+ presentes em solução, originados do sulfato de cobre, formam um complexo com os aminoácidos, estabelecendo interações com os átomos de nitrogênio da cadeia peptídica. Esse complexo formado confere uma coloração púrpura característica a solução. Esta reação é positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos. A reação também é positiva para substâncias que contenham dois grupos carbamínicos (-OC-NH2-) ligados diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio. A solução da clara de ovo, quando submetida à reação do biureto, apresentou coloração púrpura, indicando a provável presença de peptídeos em solução. A solução de água destilada submetida ao mesmo procedimento apresentou coloração azul clara, provavelmente devido à alcalinização do sulfato de cobre.
As bases, mesmo fortes, não precipitam as proteínas apesar de elas quebrarem também as pontes de hidrogênio e ligações iônicas. No entanto, o meio alcalino aumenta substancialmente o número de cargas negativas presentes nas proteínas. Nestas condições, reativos como os íons de metais pesados (p.e. mercúrio, chumbo), precipitam as proteínas devido à formação de sais insolúveis (proteinatos) dos metais. (É de se observar que, mesmo em ausência de proteínas, estes metais em condições alcalinas formam hidróxidos, também insolúveis. O precipitado final consiste,