Ureia

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URÉIA UV LIQUIFORM

INDICAÇÃO MÉDICA DO EXAME
A determinação da uréia em amostras de sangue e urina é útil na avaliação da função renal.

PRINCÍPIO
A uréia é hidrolisada pela urease, gerando amônia e dióxido de carbono.

Urease
Uréia + H2O 2 NH3 + CO2

A amônia reage com o 2 cetoglutarato e NADH em uma reação catalisada pela glutamato desidrogenase (GLDH), ocorrendo oxidação daNADH a NAD. A consequente redução da absorbância, medida em 340 ou 365 nm, é proporcional à concentração de uréia na amostra.

GLDH
2 cetoglutarato + NH3 + NADH L-Glutamato + NAD

AMOSTRA
Preparo do paciente
Recomenda-se jejum mínimo de 8 horas.
Tipos de amostra
Usar soro ou plasma (fluoreto, heparina, EDTA) e urina.
Não usar anticoagulantes contendo amônia. Aconcentração de fluoreto na amostra não deve ser maior que 3 mg/mL, pois o fluoreto em altas doses é inibidor da urease. O uso do anticoagulante Glistab (Labtest Cat. 29) permite a colheita de uma só amostra para as dosagens de uréia, glicose e creatinina.
A urina de 24 horas deve ser colhida em frasco contendo 2,0 mL de HCl a 50% (V/V) e centrifugada antes de usar.
Armazenamento e estabilidade da amostraO analito é estável no soro ou plasma por 12 horas entre 15 – 25 ºC, por 3 dias entre 2 – 8 ºC e por 3 meses a 20 ºC negativos.
Volume mínimo
(Definir o volume mínimo a ser encaminhado para análise)
Volume ideal
(Definir o volume ideal a ser encaminhado para análise)
Critérios para rejeição da amostra
Presença de hemólise ou sinais de contaminação bacteriana.
Fazer referência ao manual ouPOP de colheita, separação e distribuição de material.

PRODUTO UTILIZADO
Uréia UV Liquiform, Catálogo 104-4/50 ANVISA - 10009010020
Labtest Diagnóstica
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600
Lagoa Santa, MG, 33400-000

Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 ºC.
Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 ºC.
Padrão - 70 mg/dL - Armazenar entre 2 - 8 ºC bem vedado para evitar evaporação.
Contém azidasódica 7,7 mmol/L. Disponível somente no produto catálogo 88-4/50.

Reagente de Trabalho: o conjunto de um frasco de um frasco de Reagente 1 e de um frasco de Reagente 2 permite preparar o Reagente de Trabalho.
Indicar o modo de preparação a ser utilizado no laboratório e o modo de identificação do reagente de trabalho.
Opcionalmente pode-se preparar volumes menores do Reagente de Trabalho,utilizando a proporção de 4 volumes do Reagente 1 e 1 volume do Reagente 2.
Estável 10 dias entre 15 e 25 ºC e 28 dias entre 2 – 8 ºC;
Contém tampão 76 mmol/L, pH 8,0, ADP 800 mol/L, NADH 240 mol/L, Urease 3540 U/L, Glutamato desidrogenase 400 U/L, Ácido alfacetoglutárico 12,8 mmol/L e azida sódica 15 mmol/L.

Precauções e cuidados especiais
1. Os cuidados habituais de segurança devemser aplicados na manipulação do reagente. Fazer referência ao manual ou POP de segurança.
2. Não utilizar o Reagente de Trabalho quando sua absorbância, medida contra a água em 340 nm, for igual ou menor que 1,0 ou quando mostrar-se turvo ou com sinais de contaminação.
3. Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados na manipulação do reagente.
4. Os reagentes não abertos, quandoarmazenados nas condições indicadas são estáveis até a data de expiração impressa no rótulo. Durante o manuseio, os reagentes estão sujeitos à contaminação de natureza química e microbiana que podem provocar redução da estabilidade. O laboratório deve estabelecer a estabilidade em suas condições operacionais.
5. Os reagentes contêm azida sódica, que é tóxica. Deve-se tomar cuidado para evitar aingestão e, no caso de contato com os olhos, lavá-los imediatamente com grande quantidade de água e procurar auxílio médico. A azida pode formar compostos altamente explosivos com tubulações de chumbo e cobre. Utilizar grandes volumes de água para descartar o reagente. Fazer referência ao manual ou POP de segurança.

EQUIPAMENTOS
Procedimento manual
1. Fotômetro capaz de medir com exatidão a...
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