Sequenciamento de dna

Seqüenciamento de DNA
Seqüenciamento de fragmentos de genes permite a avaliação direta de polimorfismos de
DNA, fornecendo o melhor tipo de dado para inferências filogenéticas e determinação de relações de parentesco entre indivíduos e populações. Diferentes segmentos de DNA mitocondrial (mt) e nuclear evoluem a taxas diferentes. Regiões de evolução rápida são adequadas para o estudo de organismos proximamente relacionados, enquanto regiões mais conservadas são mais apropriadas para a comparação entre táxons mais divergentes (Li &
Graur 1991, Avise 1994, Hillis et al. 1996, Page & Holmes 1998).
Genes mitocondrias
Mitocôndrias são organelas citoplasmáticas de células eucarióticas; estão envolvidas em processes fisiológicos e patológicos chave (Avise 1994, Page & Holmes 1998, Saccone et al.
2000). Em metazoários, cada mitocôndria possui uma única molécula de DNA circular, de 15-
20 Kb, contendo genes que codificam para 2 rRNAs, 22 tRNAs e 13 mRNAs responsáveis pela síntese de proteínas da respiração celular. Essa mesma composição gênica é encontrada no único genoma mitocondrial de triatomíneo já seqüenciado (o de T. dimidiata). Quando comparado com o de outros insetos, o genoma mitocondrial de 17019 pares de bases de
T . d imidiata apresenta menor composição de adenina + timina (69,5% A+T) (Dotson & Beard
2001).
A molécula de mtDNA, presente em cópias múltiplas (102-140) por célula, é de herança maternal, replica sem recombinação e evolui mais rapidamente que o genoma nuclear (Avise
1994, Saccone et al. 2000). Taxas altas de substituição são devidas, em parte, a mecanismos de reparo deficientes durante a replicação.
Genes mitocondriais são amplamente usados em estudos de genética populacional e filogenia. Variabilidades presentes em genes mitocondriais de evolução rápida são úteis na investigação de táxons que divergiram em tempos geológicos mais recentes (Avise 1994,
Simon et al. 1994, Page & Holmes 1998). Em níveis de divergência mais