Rufino

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ISSN 1679-6535 Julho, 2007 Fortaleza, CE

Foto: Maria do Socorro M. Rufino

Metodologia Científica: Determinação da Atividade Antioxidante Total em Frutas pela Captura do Radical Livre DPPH
Maria do Socorro Moura Rufino1 Ricardo Elesbão Alves2 Edy Sousa de Brito3 Selene Maia de Morais4 Caroline de Goes Sampaio5 Jara Pérez-Jiménez6 Fulgencio Diego Saura-Calixto7

Introdução
Antioxidante éum composto que protege o sistema biológico contra o efeito nocivo de processos ou reações que podem causar oxidação excessiva (KRINSKY, 1994). Evidências epidemiológicas crescentes do papel de alimentos antioxidantes na prevenção de certas doenças têm conduzido ao desenvolvimento de grande número de métodos para determinar a capacidade antioxidante (PÉREZ-JIMÉNEZ e SAURACALIXTO, 2006). Estesmétodos podem ser baseados na captura do radical peroxila (ORAC, TRAP), poder de redução do metal (FRAP; CUPRAC), captura do radical hidroxila (método de desoxirribose), captura do radical orgânico (ABTS, DPPH), quantificação de produtos formados durante a peroxidação de lipídios (TBARS, oxidação do LDL, co-oxidação do -caroteno) (FRANKEL e MEYER, 2000; SÁNCHEZ-MORENO, 2002; ARUOMA, 2003), etc. Dentreestes métodos,
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ABTS, FRAP, DPPH e ORAC são alguns dos mais usados atualmente (PÉREZ-JIMÉNEZ e SAURACALIXTO, 2006). O método DPPH (BRAND-WILLIAMS et al., 1995) é baseado na captura do radical DPPH (2,2-difenil-1picril-hidrazil) por antioxidantes, produzindo um decréscimo da absorbância a 515 nm. Esse método foi modificado por SÁNCHEZ-MORENO et al. (1998) para medir os parâmetros cinéticos.O DPPH é um radical livre que pode ser obtido diretamente por dissolução do reagente em meio orgânico (Fig. 1). Neste comunicado são relatadas todas as informações necessárias para a determinação da atividade antioxidante total em frutas pela captura do radical DPPH, baseadas em adaptações / modificações feitas nos laboratórios da Embrapa Agroindústria Tropical.

Engenheira Agrônoma, M. Sc.,Bolsista da CAPES, Doutoranda, UFERSA, BR 110, Km 47, 59625-900, Mossoró, RN, marisrufino@yahoo.com.br Engenheiro Agrônomo, D. Sc. em Pós-Colheita, Pesquisador da Embrapa Agroindústria Tropical, R. Dra. Sara Mesquita, 2270, Pici, 60511-110, Fortaleza, CE, elesbao@pesquisador.cnpq.br 3 Químico Industrial, D. Sc. em Tecnologia de Alimentos, Pesquisador da Embrapa Agroindústria Tropical,edy@cnpat.embrapa.br 4 Química Industrial, Ph. D., Professora Titular, UECE, Av. Paranjana, 1700, Campus do Itaperi, 60740-000, Fortaleza, CE, selene@uece.br; 5 Graduanda em Química, Bolsista CNPq, UECE 6 Licenciada em Ciência e Tecnologia dos Alimentos, Doutoranda/I3P-CSIC, Departamento de Metabolismo y Nutrición, Instituto del Frío, CSIC, Ciudad Universitaria, José Antonio Novais, 10, 28040, Madri, Espanha 7Licenciado em Ciências Químicas, Professor, Pesquisador, D. Sc., CSIC. fsaura@if.csic.es

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Metodologia Cient ífica: Determinação da Atividade Ant ioxidante Tot al em Frutas pela Captura do Radical Livre DPPH

Ilustração: Edy Sousa de Brito

O2N
N

O2N R NO2

N O2N

+

R

N

N O2N

NO2

cor: violeta-escura
Fig. 1. Estabilização do radical livre DPPH.

cor:violeta-clara

Materiais Necessários
Reagentes
Acetona P.A. Ácool metílico P.A. Água destilada DPPH (2,2-Diphenyl-1-picryl-hidrazil) (PM = 394,3) Sigma, código 095K1452, ou equivalente

frasco de vidro, devidamente etiquetado. Armazenar em temperatura ambiente por tempo indeterminado.

Solução controle de álcool metílico, acetona e água
Em balão volumétrico de 100 mL, adicionar 40 mL da solução deálcool metílico 50% (item solução de álcool metílico a 50% ) e 40 mL da solução de acetona 70% (item anterior). Completar o volume para 100 mL com água destilada, homogeneizar e transferir para um frasco de vidro, devidamente etiquetado. Armazenar em temperatura ambiente por tempo indeterminado.

Equipamentos e vidrarias
Agitador de tubos de ensaio Balança analítica Balão volumétrico 100 mL e...
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