Rizóbio

Coleta de solo para estudo de populações de rizóbio

As populações de rizóbio serão capturas a partir de amostras de solo coletadas na área na profundidade de 0-20cm, faixa do solo onde ocorre maior densidade de microrganismos e maior disponibilidade química de nutrientes para as plantas. As amostras serão coletadas obedecendo ao esquema de “zig-zag” a fim de representar toda área, utilizando trado. Em cada área serão coletadas três amostras, que será composta por 15 sub-amostras. Cada amostra representará uma unidade de repetição para fins de análises estatísticas.

Determinação da densidade e potencial de fixação de nitrogênio das populações nativas de rizóbio.

Um experimento em casa-de-vegetação em vasos de Leonard ser montado para estimar a densidade da população de rizóbio e seu potencial para fixar nitrogênio. Uma quantidade de 10 g de cada amostra de solo será diluída em 90 mL de solução salina (0,85% NaCl) para obter a suspensão da amostra 10-1. O frasco contento a suspensão 10-1 será posto para agitar a 50 rpm por 30 minutos. Após a agitação, será feita uma diluição seriada decimal transferindo 1 mL da diluição 10-1 para um tubo contendo 9 mL de solução salina, obtendo a diluição 10-2, e assim sucessivamente até obter a diluição 10-7. As plantas serão inoculadas com 1 mL de cada solução. Três repetições serão utilizadas para cada diluição. Dois tratamentos controle serão incluídos para fins de avaliar o potencial de fixação de nitrogênio pelas populações nativas: um não inoculado e adubado com nitrogênio mineral (ver recomendação de adubação em vaso, forma e quantidade de N, para a espécie que será utilizada para capturar as populações) e outro inoculado com a estirpe recomenda para a espécie. Um tratamento não inoculado e sem adição de nitrogênio será adicionado para fins de controle de contaminação.

Aos 30 dias após a germinação, as plantas serão coletadas e será avaliado: a presença de nódulos, o número de nódulos, a matéria da parte aérea