Replicação

O DNA é o repositório molecular da informação genética

Replicação de DNA
Replicação

DNA

Transcrição

Prof. Eduardo Moraes Rego Reis
Instituto de Química – USP

Tradução

QBQ3401 – 2007
Química noturno

Proteína

Replicação do DNA
Processo que precede a divisão celular e através do qual são geradas cópias idênticas das moléculas de DNA presentes na célula-mãe, a seguir herdadas pelas duas células-filhas

Mecanismo de replicação do DNA

“Não escapou a nossa atenção que o pareamento específico ora proposto por nós sugere imediatamente um possível mecanismo de cópia do material genético”
Watson & Crick, Nature, 1953

Duplicação dos cromossomos Separação dos cromossomos Divisão celular

Fita 1 parental
Fita 2 parental

• O mecanismo de replicação é baseado no pareamento das bases da dupla hélice do
DNA.
• A estrutura do DNA contém a informação necessária para perpetuar sua sequência de bases Fita 1
Fita 2 Fita 1 Fita 2 parental “filha” “filha” parental

Modêlos para a replicação do DNA

Replicação do DNA é semi-conservativa
Experimento de Meselson & Stahl, 1958
Cultivo de bactérias em meio contendo 15NH4Cl,
Isótopo pesado de
N

Transferência para meio contendo 14NH4Cl
Molécula parental

Primeira geração de moléculas “filhas”

Extração e purificação do DNA seguida de centrifugação em gradiente de CsCl

Replicação conservativa

Segunda geração de moléculas “filhas”

1

Replicação do cromossomo bacteriano
Cultivo de bactérias em meio contendo
Trítio (3H), isótopo radioativo de H

Isolamento do DNA, espalhamento em emulsão fotográfica

Replicação se inicia em um único ponto do DNA
DNA parcialmente desnaturado revela regiões ricas em A-T

Observação em microscópio eletrônico

Experimento de J. Cairns, 1963

Replicação é bi-direcional
Replicon
Unidade do DNA onde está ocorrendo um evento de replicação •

Origem + Término

•

Ativados apenas uma única vez em