Relátorio de Microbiologia

Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia – UESB
Departamento de Estudos Básicos e Instrumentais - DEBI

Técnica de Diluição Seriada e Contagem Padrão em Placa

Bianca Souza Cana Verde – 201210649
Kérlen Sabrina Vieira Moreira – 201210216
Disciplina de Microbiologia Ambiental
Docente: Kátia Iro

Itapetinga – BA
Outubro de 2013
Introdução
Diluição é o procedimento da adição de uma substância a outra para reduzir a concentração de uma das substâncias. As diluições em que a quantidade de substância a ser diluída corresponde à unidade, ou múltiplos da unidade, e o volume final da solução diluída é igual a 10 ou múltiplo de 10 é denominada de Diluição Decimal.
A diluição seriada é utilizada para evitar a saturação de colônias no método de contagem das placas, ou seja, limita o número de colônias bacterianas que irão desenvolver-se na placa de petri com meio para facilitar a contagem.

Materiais Utilizados
- Amostra de solo a ser previamente diluída.
- Pipetas graduadas de 1 a 5 ml.
- 225 ml de Água Peptonada.
- Tubos com diluição de água peptonada 9 ml em cada.
- Placas de Petri esterilizadas contendo PCA (Agar Padrão para Contagem).
- Estufa de Incubação a 35°C.

Procedimentos
Pesou-se 25g da amostra de solo e homogeneizou com 225 ml de água peptonada. Retirou-se 1 ml do inoculo original com auxilio de uma pipeta de 1ml graduada e esterilizada para iniciar o procedimento da diluição, sempre próximo ao bico de Busnen com chama. Próximo ao fogo flambando a boca do frasco, abriu-se o mesmo depositando o inoculo, ficando com concentração de 1:10. Retirou-se 1 ml dessa nova amostra e inseriu no segundo frasco, atingindo a nova concentração de 1:100. Repetiu-se o procedimento, retirando 1 ml da nova concentração e adicionando em um outro frasco, obtendo uma concentração de 1:1000.
Após esses passos, para iniciar o processo de Semeadura em superfície, utilizou