relatório de biologia molecular
CENTRO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE
DISCIPLINA: CBF331- PRÁTICA EM BIOLOGIA MOLECULA
RELATÓRIO :
TÉCNICAS DE PIPETAGEM ESTÉRIL E MICROPIPETAGEM
Florestal, Setembro de 2014
Introdução:
Os procedimentos e técnicas de laboratório de biologia molecular requerem muita atenção e cuidado, pois para estes fins são utilizados volumes em microescalas, e estes volumes necessitam de máxima precisão para que o experimento tenha sucesso.
Reagentes e amostras como o DNA são medidas em escalas pequenas utilizando micropipetas ajustáveis, os procedimentos e manipulação são realizados em condições estéreis para garantir a confiabilidade dos dados.
As micropipetas variam geralmente de 0,5 a 1000 microlitros, e devem ser usadas de maneira como:
-Nunca usar micropipetas sem a sua ponteira adequada;
- Nuca passar o ajustador de volume ate o limite de capacidade da pipeta;
- Nunca soltar bruscamente o botão após retirar ou descartar um liquido( somente a ponteira),
- Nunca flambar a ponteira( ela já deve ser previamente esterilizada).
Ao pipetar deve-se ajustar previamente o volume desejado, utilizando a micropipeta adequada, encaixar a ponteira firmemente na extremidade da micropipeta.
A maioria das micropipetas possui duas posições de para : o primeiro estagio indica o volume desejado( utilizado quando for realizar coleta de um liquido), o segundo estagio, quando submetido pressão extra, é usado somente para fazer o descarte do liquido.
Deve-se certificar que o volume puxado corresponde ao volume desejado: uma pipetagem deve ser realizada mantendo-se o microtubo ao nível dos olhos, certifique-se de que não tenha havido formação de bolha de ar durante a pipetagem.
Após a