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Relatório: Técnica de Coloração de Gram
Aula Prática de Laboratório

INTRODUÇÃO Com o propósito de estudar as suas propriedades e/ou de diferenciar os microrganismos em grupos específicos para fins taxonômicos e de diagnóstico, recorre-se normalmente a técnicas de coloração. A coloração de Gram, desenvolvida em 1884 pelo médico dinamarquês Christian Gram, é um dos métodos de coloração mais aplicados em Bacteriologia. Trata-se de um método de coloração diferencial, dado que permite dividir as bactérias em duas classes - Gram negativas e Gram positivas. É uma ferramenta essencial na classificação e diferenciação de bactérias. Esta diferenciação baseia-se na diferente estrutura e composição, nomeadamente no diferente teor lipídico, da parede celular de bactérias Gram positivas e Gram negativas. A parede celular das bactérias Gram negativas tem um teor em lípidos elevado na sua membrana externa. A parede celular das bactérias Gram positivas é constituída principalmente por uma camada grossa de peptidoglicano e o seu teor em lípidos é nulo ou muito baixo.

FINALIDADE Evidenciar características morfológicas das bactérias, classificando-as em gram-positivas e gram-negativas.
MATERIAS UTILIZADOS
Cultura coletada entre os dentes
Lâminas para microscopia
Microscópio
Bico de Bunsen
Óleo de imersão
Suab
Violeta de cristal
Lugol - solução de iodo álcool etílico a 95 %
Fucsina
Papel toalha

PROCEDIMENTO

1. Coleta Pegar uma lâmina e identificar com o pincel, em seguida foi utilizada o suab para colher a amostra entre os dentes, esfregou-se o suab com a amostra na lâmina no lado em que estava a identificação e esperou secar por 5minutos.

2. Fixação Feito a fixação do material a lâmina através da chama no bico de Bunsen.

3. Coloração
Colocou-se a lâmina com o esfregaço sobre um suporte na pia.
Cobriu-se a lâmina com cristal violeta(Gram I) foi deixado agir por 1minuto.
A lâmina foi lavada em jato fraco de água corrente.