Reagentes usados para extração de dna

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  • Publicado : 30 de março de 2011
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Reagentes Utilizados para Extração de DNA

NaCl 5M

- Pesar 292,2 g de NaCl
- Dissolver em 800 ml de água MilliQ
- Ajustar o volume para 1 litro
-Autoclavar
- Armazenar a temperatura ambiente

NaCl 1,2 M

- Adicionar 24 mL de NaCl 5 M a 76 mL de água MilliQ
- Armazenar a temperatura ambiente

Tris-HCl pH7,5; 8,3 e 8,6 – 1 M

- Pesar 121,1 g de tris base
- Dissolver em 800 ml de água MilliQ
- Ajustar o pH com HCl para 7,5; 8,3 ou 8,6.
- Ajustar o volume para 1litro com água MilliQ
- Autoclavar
- Armazenar à temperatura ambiente

EDTA 0,5M pH 8,0

- Pesar 186,1 g de EDTA (Etileno diamotetraacetato disódico) eaproximadamente 20g de pastilhas de NaOH
- Dissolver o EDTA em 800 mL de água MilliQ
- Agitar vigorosamente no agitador magnético
- Ajustar o pH para 8,0 com NaOH- Ajustar o volume para 1 litro com água MilliQ
- Autoclavar
- Armazenar a temperatura ambiente

Solução de DTAB 12% (w/v)
- Pesar 3 g de brometo dedodeciltrimetilamonia (DTAB).
- Dissolver em solução preparada com 11,25 mL de NaCl 5M, 3,75 mL de Tris-HCl, pH 8,6 e 3,75 mL de EDTA 0,5 M.
- Ajustar o volume para25 mL com água MilliQ
- Pode ser armazenado em temperatura ambiente por dois meses

Solução CTAB 5% (w/v).
- Pesar 1,25 g de brometo de cetilmetilamônia (CTAB)- Dissolver em 20 mL de água MilliQ.
- Adicionar 2,0 mL de NaCl 5M
- Ajustar o volume para 25 mL com água MilliQ.
- Pode ser armazenado em temperaturaambiente por dois meses

Etanol 70%

- Adicionar 70 mL de etanol 99,5% a 30 mL de água MilliQ.

Etanol 95%

- Adicionar 95 mL de etanol a 5 mL de água MilliQ.
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