Quimica

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COLORAÇÕES CITOQUÍMICAS
INTRODUÇÃO E IMPORTÂNCIA
Citoquímica é a aplicação de corantes bioquímicos à células do sangue e medula óssea, de maneira a refletir sua composição sem modificar apreciavelmente sua morfologia. Colorações citoquímicas são auxiliares diagnósticos importantes em leucemias e em outras doenças hematológicas. É importante compreender que o estudo das células do sangue e damedula, através técnicas especiais, é complementar ao estudo clássico de suas morfologias ( evidenciadas após colorações panóticas). Sem dúvida, a riqueza de detalhes observáveis em extensões assim coradas (Leishmann, May-Grunwald, Giemsa...), é o ponto de partida indispensável para estudos subseqüentes. Como qualquer reação colorida ou técnica de coloração por adsorção ou partição, a sensibilidadeé o “calcanhar de Aquiles” dos métodos citoquímicos, Assim, embora saibamos que existam lipídeos e proteínas em todas as células, não é possível corar, com técnicas específicas para estas classes de substâncias, todas as estruturas que as contém. Por outro lado, interessam-nos apenas as colorações que possam esclarecer aspectos da fisiopatologia das células do sangue e seus precursores, maisprecisamente, aquelas que tenham valor diagnóstico e/ou prognóstico. As colorações citoquímicas incluem: - Sudan Black B; - Ácido periódico de Schiff (PAS); - Perls (reação do azul da prússia); - Colorações para várias enzimas etc; Note que, embora existam métodos histoquímicos (i.é., colorações bioquímicas em tecidos, preservando a morfologia) para proteínas, peptídeos e ácidos nucléicos, estascolorações são quase ausentes da rotina laboratorial, porque seu interesse diagnóstico é menor. Há um grande número de estudos feitos com granulócitos de humanos e de animais, que procura estabelecer o mecanismo de ação destas células, desde sua migração (da medula óssea para o sangue), até os fenômenos responsáveis pela morte de microorganismos ou a fagocitose de substâncias estranhas presentes nacirculação e nos tecidos. Os dados presentes na literatura nem sempre são coincidentes, devido as variações de material e procedimentos utilizados. Entretanto, o reconhecimento dos tipos de granulações presentes nestas células, a dinâmica de seu aparecimento durante a maturação da linhagem, as enzimas nelas contidas e seu papel nos diversos processos fisio e patológicos, de que participam os granulócitos,devem muito a este tipo de estudo.

TÉCNICAS MAIS USADAS: PRINCÍPIO
COLORAÇÃO PELO PAS
A reação do ácido periódico de Schiff é importante na histo e na citoquímica de carbohidratos. Reações positivas indicam a presença de glicogênio, um polímero de glicose e de outros 1,2-glicóis. É uma reação efetuada em duas etapas: na primeira, grupos vicinais hidroxil são oxidados a aldeídos; na segundaetapa, os dialdeídos formados são demonstrados usando-se o reagente de Schiff, que é o corante fucsina básica. A cor produzida varia entre o púrpura e o magenta, nos sítios onde se localizam carboidratos oxidáveis (mono-, oligo- e polissacarídeos, glico- e mucoproteínas). Os granulócitos neutrófilos maduros contêm altos níveis de glicogênio, necessário à célula, para fagocitose. As célulasblásticas granulocíticas quase não possuem glicogênio. Na verdade, é a partir do promielócito, que o teor de glicogênio torna-se evidente, demonstrável pelo PAS. A positividade aumenta com a maturação. Este glicogênio é bastante lábil e é rapidamente consumido em situações de baixa glicemia, sendo também rapidamente reposto. Os granulócitos eosinófilos e basófilos possuem polissacárides como osneutrófilos. Nos basófilos, a heparina e o ácido hialurônico são responsáveis pela basofilia, Nos eosinófilos, os polissacárides não parecem se localizar nas granulações, que por conterem grande quantidade de proteínas básicas ricas em arginina (responsáveis pela afinidade aos corantes ácidos), não se coram pelo PAS.

SUDAN BLACK B
Os corantes de SUDAN, como o sudan black B são substâncias...
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