Protocolo drosophila melanogaster

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AGRUPAMENTO DE ESCOLAS DE MASSAMÁ
ESCOLA SECUNDÁRIA
STUART CARVALHAIS

Biologia – 12º Ano

2012/2013

Cruzamento Genético de Drosophila melanogaster - Protocolo Experimental

1 – Características morfológicas e ciclo de vida de Drosophila melanogaster
O ciclo de vida de Drosophila melanogaster é muito curto – cerca
de 12 dias a uma temperatura de 25°C. Temperaturas
inferiores alongamo ciclo de vida. O seu ciclo de vida (figura
1) inclui os seguintes estádios: ovo, larva, pupa e adulto(a).
O estádio larvar apresenta três subestádios, sendo caracteri zado pela ingestão constante de nutrientes para que seja
possível a metamorfose, transformando-o(a) em adulto(a).
Figura 1 – Ciclo de vida

Pupa e Metamorfose - à medida que a larva entra na fase de
pupa, rasteja para forada papa e fixa-se aos bordos do
recipiente. A sua cobertura endurece e escurece e simultaneamente a metamorfose toma lugar, onde um corpo em forma de verme se transforma numa mosca
da fruta adulta. Apesar do casulo da pupa ser escuro, ele é suficientemente transparente para que se
possam observar as transformações.
Fêmea adulta
Macho adulto O adulto jovem quando eclode apresenta um estadoimaturo: é
mais claro e as asas ainda não estão completamente
desenroladas. A transição jovem - adulto leva cerca de 12 horas
desde a eclosão do estado de pupa - só acasalarão após este
lapso de tempo. As fêmeas armazenam o esperma no seu
aparelho genital até que os ovos sejam produzidos; é por isso
essencial nos trabalhos de cruzamentos controlados, que a
condição de virgindade se verifique.Figura 2 - Wild type
(tipo selvagem)

2 – Observação de Drosophila
A observação dos diferentes fenótipos e a distinção dos sexos é feita
à lupa, mantendo os insetos imóveis durante alguns minutos, e
manipulando-os com um pincel de guache para que não sofram
danos na sua integridade física.
Se os indivíduos tiverem atingido o estado adulto, o dimorfismo é
evidente: as fêmeas são maiores eapresentam alternância típica de
listas claras e escuras nos segmentos abdominais, enquanto os
machos são de menores dimensões e têm a extremidade do
abdómen negra (figura 2). Porém, estas diferenças podem não ser
óbvias nos indivíduos que eclodiram há pouco tempo. Assim, deverá
recorrer-se à observação do metatarso do par de patas anterior (1º
junto à cabeça), já que o macho possui aí umaestrutura pilosa
denominada pente sexual, que as fêmeas não apresentam (figura 3).

1

Figura 3 -

3 – Objetivos
1.
2.
3.
4.

Compreender o mecanismo de transmissão dos caracteres hereditários.
Distinguir carácter dominante de carácter recessivo.
Inferir a localização do alelo responsável pela mutação utilizando as leis de Mendel.
Compreender o conceito de fenótipo e genótipo.

4– Tempo estimado  28 dias

Não se esqueça de:
usar bata;
cumprir as regras de segurança do laboratório.

5 – Material
Stocks de moscas com olhos wild type (w+) e white (w)
Câmara de adormecimento (eterizador)
Pincéis (para manipular as moscas)
Estufa a 25°C
Lupa de mão ou binocular
Canetas de acetato (ou outra)
Etiquetas
Frascos com papa fresca

6 - Procedimento

Gaze
AlgodãoVidro de relógio /caixa de
Petri
Papel de filtro
Frasco com tampa
Detergente
Água

A. CRUZAMENTO DIRETO
1º Cruzamento – Parental
1º. Depois de anestesiar algumas moscas do stock fêmeas selvagens, observe a sua morfologia e em
seguida selecione 3 fêmeas virgens.
2º. Coloque as fêmeas selecionadas num tubo de cultura previamente preparado.
Nota1: Para evitar que os indivíduos fiquemcolados ao meio de cultura, tenha o cuidado de os depositar
nas paredes do tubo, até que recuperem da anestesia, colocando o tubo deitado sobre a bancada de
trabalho.
3º. Proceda de forma idêntica ao 1º ponto, mas para o stock que contém os machos de olhos brancos.
4º. Selecione 2 machos de olhos brancos e coloque-os no mesmo tubo de cultura onde colocou as fêmeas
virgens de olhos selvagens....
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