pratica de ASO

TESTE DE ANTI-ESTREPTOLISINA O (ASO)

Princípio do Método
O método fundamenta-se em uma reação de aglutinação de partículas de látex que contém estreptolisina O adsorvida com o anticorpo correspondente (Anti-estreptolisina O), detectado no soro do paciente através da reação de aglutinação. A aglutinação é visível em amostra com concentração igual ou superior a 200 UI/mL de anti-estreptolisina. Tem como finalidade a determinação qualitativa e semi-quantitativa da Anti-estreptolisina O.
Material e reagentes
Lâmina escavada de fundo escuro, espátulas, pipeta automática de volume até 100 µl, ponteiras, solução NaCl 0,9% e soluções reagentes:
- Número 1 – Látex ASO – Suspensão de partículas de látex revestida com estreptolisina O;
- Número 2 - Controle positivo – Solução aglutinante de látex;
- Número 3 – Controle negativo – Solução Salina 0,85%.
Amostra: soro sem diluir
Obs.: Soros hemolisados ou lipêmicos podem fornecer resultados falso-positivos, por poder produzir aglutinações inespecíficas. Não deve ser usado plasma porque o fibrinogênio pode causar aglutinação inespecífica das partículas de látex.
Procedimento
Prova qualitativa:
1. Colocar em campos distintos da placa: amostra e controles (negativo e positivo) – 20 µl. Ver tabela 1.
2. Adicionar o reagente de látex – 20 µl em cada campo. Ver tabela 1.
3. Homogeneizar com um bastão misturador durante 4-5 segundos até obter uma suspensão uniforme, utilizando toda a extensão de cada círculo da lâmina.
4. Agitar suavemente a placa com movimentos rotatórios durante 2 minutos.
5. Observar macroscopicamente o resultado se houve evidência de aglutinação com uma luz artificial.
Uma aglutinação clara indica a presença de anti-estreptolisina O igual ou superior a 200 UI/ml. (Neste caso, realizar a prova semi-quantitativa).
Tabela 1 Círculo N°1 Círculo N°2 Círculo N°3
Controle Negativo 20ul --- ---
Controle Positivo --- 20ul ---
Amostra --- --- 20ul
Reagente Nº1 20ul 20ul 20ul

Prova