Origem taq polimerase

TAQ POLIMERASE Ainda na década de 60 muitos pesquisadores procuraram obter a síntese de DNA in vitro. É evidente que obter DNA em tubo de ensaio é o primeiro passo para um universo de experimentos em genética molecular. O primeiro a conseguir caminhar neste sentido foi Arthur Kornberg, de quem já falamos na aula sobre replicação do DNA. Era natural, já que Kornberg era um profundo conhecedor das DNA polimerases. A síntese de um DNA viral in vitro foi recebida com entusiasmo por todos, inclusive a imprensa leiga, que qualificou o feito como a criação da vida em laboratório. Esta metáfora tem sido usada pela imprensa com insistência em várias ocasiões, sempre que se trata de manipular o DNA de um ser vivo, e em geral provoca mal estar entre os pesquisadores, o que foi o caso de Arthur Kornberg. Em 1983, Kary Mullis, então pesquisador empregado na Cetus Corporation, EUA, imaginou uma forma de fazer com que a DNA polimerase iniciasse e terminasse seu trabalho em trechos pré-determinados do DNA. Com o sistema seria possível amplificar milhões de vezes um pequeno trecho de um longo segmento de DNA. A ideia foi aprimorada na Cetus e apresentada pela primeira vez em 1985, numa conferência. Depois disso a técnica, conhecida como PCR, ganhou quase instantaneamente uma aceitação mundial e em menos de uma década tornou-se o procedimento básico de todo laboratório de genética molecular no mundo.
Mas, afinal, o que é a PCR?
A sigla significa PCR "polymerase chain reaction", que em português seria reação em cadeia da polimerase. Então, a base da técnica é a ação in vitro da DNA ´polimerase. Para compreendermos como funciona a técnica, que é na verdade bem simples, precisamos recordar que, para iniciar a síntese de uma fita nova, a DNA polimerase precisa de um primer (de RNA ou de DNA), de um DNA molde e de precursores de síntese de DNA, coletivamente chamados dNTPs (desoxinucleotídeos tri-fostato, i.e., dATP, dTTP, dCTP e TGTP). A ideia de Mullis era simples.