Northenr botting

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Biologia Molecular

Northern blotting

Erislayne
Karoline
Larissa
Mirella
Paloma
Rafael
Victor
1º análises clínicas

Contagem
Agosto 2012
Erislayne, Karoline, Larissa, Mirella, Paloma, Rafael, Victor.

Northern blotting

Trabalho apresentado ao Professor: Wellerson Britto
 Da disciplina: Biologia Molecular
Da turma: A
 Turno: Tarde
Do curso de: Análises Clínicas

Contagem
FUNEC
2012Epigrafo:

O Northern blot estuda o perfil de expressão de RNA mensageiro, onde, quando e quanto de determinado RNA mensageiro (correspondente à expressão de um determinado gene) está presente numa dada amostra. É uma das formas mais simples de determinar em que momento certos genes estão a ser expressos em sistemas vivos. Neste processo, o RNA é separado numa electroforese em gel, transferido para umamembrana e detectado de forma similar ao DNA no Southern blot.

Contagem
FUNEC
2012

Resumo:
Northern blotting

O Northern Blot é uma técnica usada na pesquisa em biologia molecular para estudar a expressão gênica, ou seja, verificar se um determinado gene de um genoma é ou não transcrito em RNA e quantificar isso. Essa técnica tem tal nome devido à similaridade de seu procedimento com o Southernblot (batizada pelo biólogo britânico Edwin Southern; com a diferença chave de que, em vez de DNA, a substância analisada por eletroforese com uma sonda hibridizadora é RNA).
Uma diferença no procedimento (quando comparada com o Southern blot)é a adição de formaldeído no gel de agarose, que funciona como um desnaturante.
Como no Southern blot, a sonda hibridizadora pode ser feita de DNA ou RNA.Sumario:

Contagem
FUNEC
2012

Introdução:
1- O que é

1.1 - É uma técnica utilizada nas pesquisas da área de biologia molecular para estudo da expressão gênica.
1.2- A análise por Northern blot revela informações sobre a  identidade do RNA , tamanho, a abundância, permitindo um entendimento mais profundo dos níveis de expressão de genes. Esta técnica e feita através da detecção do RNA (ou mRNAisolado) numa amostra.

Contagem
FUNEC
2012
Desenvolvimento:
2- Aprofundando melhor:
Para entender os processos do northern blotting precisa se saber o que e um gene e genoma e sua importância. Os genes estão localizados nos cromossomos disposto linearmente, Cada gene é formado por uma sequencia específica de ácidos nucleicos, Os genes controlam não só a estrutura e as funções metabólicas dascélulas, mas também todo o organismo. Quando localizados em células reprodutivas, eles passam sua informação para a próxima geração, ou seja, o gene carrega as informações genéticas de uns indivíduos que das suas características próprias estas características são herdadas dos pais, Quimicamente, cada gene é constituído por uma sequencia de DNA que forma nucleotídeos. Um conjunto de gene e denominadogenoma. O gene geralmente localiza-se intercalado com as sequencias de DNA não codificado por proteínas. Estas sequenciam são designadas como “DNA inútil”. Quando este tipo de DNA ocorre dentro de um gene, a porção codificada é classificada como parte não codificada. O DNA inútil compõe 97% do genoma humano e, apesar de seu nome, ele é necessário para o funcionamento adequado dos genes. E éexatamente isto que o processo de northern blotting estuda.
3- Historia:
Northern blotting foi desenvolvido em 1977 por James Alwine e George Stark da Universidade de Stanford. O nome dessa técnica deriva da similaridade existente entre ela e o procedimento de Southern Blot, nominada pelo biólogo britânico Edwin Southern, havendo distinção na chave, que ao invés de ser DNA, o material genéticoprocurado é o RNA. Estes métodos têm sua utilização limitada devido ao elevado custo.
4- Processos:
Os mesmos procedimentos utilizados para a técnica de Southern também se aplicam aqui, ou seja: extração de RNA, endonuclease de restrição, separação dos fragmentos com eletroforese, transferência para a membrana de nylon, pré-hibridização e hibridização com sonda marcada radioativamente, com...
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