Mm

A quantidade de atividade enzimática pode ser específica ou molar (útil quando o número de moles é conhecido)
Técnicas modernas:




imobilização engenharia das proteínas
Engenharia genética

Mecanismo reacional de Michaelis e Menten – 1913

E+S

K+1
K-1

ES

REVERSIVEL

K+2
,

E+P

IREVERSSIVEL





E- ENZIMA



S- SUBSTRATO



P – PRODUTO

ES - COMPLEXO ENZIMASUBSTRATO


K – CONSTANTE DE VELOCIDADES

A enzima libertada no último passo é “pura”, ou seja apresenta uma constituição idêntica como no início da reação.
As reações secundárias são muito importantes para o estudo de moléculas complexas pois é possível acompanhar a reção ao longo de um intervalo de tempo maior.

Á medida que a concentração inicial do substrato aumenta, as velocidades de formação do produto se tornam cada vez maiores. No equilíbrio da primeira etapa existirá cada vez mais
ES e nestas condições haverá maior concentração possível do complexo ES logo a reação será processada na máxima velocidade possível.

A dada altura existirá uma concentração de substrato que provocará a formação de uma concentração de ES igual á metade da máxima possível. Logo a velocidade será metade da velocidade máxima. Esta constante de substrato é igual á constante de Michaelis-Menten ou Km

DEDUÇÕES

Hipóteses restritivas
Uso de velocidades iniciais
 Equilíbrio químico (1ºpasso)

Constante de equilibrio Constante de dissociação  Estado estacionário para o complexo ES
O complexo intermediário/ composto intermédio (ES) não se acumula

Hipotse de equilibrio quimico

Hipótese de estado estacionário

K-1 + K+2 >> K+1

K-1 + K+2 >> K+1

k-1 >> K+2 (mais restritiva)

TER EM ATENÇÃO:
K (maiúsculo) diz respeito a constantes de equilíbrio
K (minúsculo) diz respeito as constantes de velocidade

Análise da curva de Michaelis-Menten

PARAMETROS CINETICOS
V

max

depende de fatores com a temperatura, pH, concentração de substrato e de

enzimas iniciais. O Km determina a afinidade da enzima perante um determinado