Microbiologia

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Isolamento de Culturas Puras
- Método de Estria ou Esgotamento: com o auxílio de uma alça, espalha-se uma amostra de cultura de bactéria E.coli em uma placa com meio de cultura TSA várias vezes bemjunto à borda da placa. Puxa-se com a mesma alça um traço da cultura para uma região "limpa" do meio de cultura e espalha-se novamente várias vezes. Flambar novamente a alça, deixá-la esfriar erepetir o procedimento noutra área da placa. Em seguida, as placas são incubadas em estufa a 370 C por 24h.
Essa técnica permite a avaliação qualitativa da colônia de bactéria, ou seja, a visualização dedos seus aspectos macro morfológicos. Entretanto, os procedimentos não foram corretamente executados pelo grupo e por isso não foi possível observar culturas isoladas. O esperado seria colôniaspequenas de coloração esbranquiçada e aspecto cremoso.

- Método da Diluição Seriada: de um meio de cultura de E.coli pipeta-se 0,05mL para um tubo de ensaio contendo 5mL de solução salina. Homogeneíza-sea solução e pipeta-se 0,05mL para outro tubo com 5mL de solução salina, que terá diluição final de 10-4. Dessa solução pipeta-se 0,5mL para um tubo contendo 4,5mL de solução salina, resultando numadiluição de 10-5, e por fim pipeta-se 0,5mL dessa solução em um tubo com 4,5mL de solução salina, resultando em uma diluição de 10-6.
Em seguida, adicionar em placas contendo meio de cultura 0,1mL dassoluções diluídas em 10-4, 10-5 e 10-6.
Das placas com diluições 10-4 e 10-5 não foi possível obter colônias isoladas da bactéria E.coli. Já na placa com diluição 10-6 obteve-se cerca de 481colôniasisoladas.
Na placa com diluição 10-6 pode-se considerar que cada bactéria origina uma colônia. Logo, se foram obtidas 481 colônias em 0,1mL de uma solução com diluição de 10-6, o título da soluçãooriginal é:

Título = 481 x 106 / 10-1 = 4,8 x 10 9 bactérias/mL

Esse resultado está próximo ao esperado, de 109 bactérias/mL.


Presença de Microorganismos no Ambiente
Utilizaram-se três...
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