Microbiologia pratica

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MICROBIOLOGIA PRÁTICA
UNIVERSIDADE FERNANDO PESSOA FACULDADE DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIAS
PORTO

MESTRADO INTEGRADO EM MEDICINA DENTÁRIA 2011/2012 2º Ano de Medicina Dentária

UNIVERSIDADE FERNANDO PESSOA - FACULDADE DE CIÊNCIAS E TECNOLOGIAS

INSTRUÇÕES PARA AS AULAS PRÁTICAS DE MICROBIOLOGIA Os microrganismos podem causar doenças no Homem e portanto a sua manipulação laboratorial requercuidados específicos para a sua segurança pessoal evitando a sua contaminação e a daqueles que o rodeiam. TÉCNICA ASSÉTICA Uma cultura bacteriana considera-se cultura pura quando os microrganismos descendem todos da mesma célula (clone). Os métodos usados para a obtenção de culturas puras são designados por técnica assética. Se a técnica assética não for cumprida, há uma grande probabilidade decontaminação das culturas em estudo, o que implica a obtenção de falsos resultados.      Manter o bico de Bunsen aceso durante qualquer repicagem; Esterilizar sempre a ansa, aquecendo-a ao rubro, antes e após cada utilização; Arrefecer a ansa antes de semear a placa ou tubo do meio de cultura, pois caso contrário pode matar as bactérias a estudar; Manter folhas, cadernos, álcool longe do bico deBunsen; Ter cabelos amarrados e a bata bem fechada. EXERCÍCIO Nº1: USO DO MICROSCÓPIO EM MICROBIOLOGIA

INTRODUÇÃO
Os microrganismos (bactérias, fungos, protozoários e vírus) não são, visíveis a olho nu, dado que os nossos olhos não têm poder de resolução para os visualizar. Recorre-se por isso ao microscópio. O microscópio do laboratório de aulas tem um poder de resolução muito superior (~1000x) ao poder de resolução dos nossos olhos. A qualidade de imagem que vemos depende do grau de contraste entre a amostra colocada numa lâmina de vidro e o ambiente circundante. É possível constatar que as preparações a fresco são de difícil observação tendo de manipular o condensador e o diafragma a fim de obter maior contraste. Em Microbiologia recorre-se muito à observação de amostrasbiológicas fixadas e coradas sobre lâminas de vidro, o que facilita a observação de contraste. ESTRUTURA DO MICROSCÓPIO E FUNÇÃO Basicamente o microscópio tem uma parte mecânica e um sistema ótico, constituído por um conjunto de lentes: 2 oculares (10x) e geralmente por 4 objectivas (4x, 10x, 40x, 100x). a ampliação final é dada pelo produto: AMPLIAÇÃO DA OBJECTIVA x AMPLIAÇÃO OCULAR A objectiva dá a imagemreal e a ocular dá a imagem virtual. As objectivas, após movimentos mecânicos, focam a amostra. As objectivas de 4x, 10x, 40x são lentes secas e a lente de maior ampliação (1000x) é a objectiva de imersão, que mergulha no óleo de cedro (óleo de imersão) colocado sobre a lâmina. Esta lente vai permitir melhor observação.

MICROBIOLOGIA PRÁTICA – PROF. CRISTINA PINA

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Note que o óleo de imersão tem um índice de refracção semelhante ao do vidro das lentes e não ocorre dispersão da luz como acontece ao atravessar o ar. O condensador pode subir até à platina do microscópio a fim de obter completa iluminação da amostra ou descer de modo a diminuir a luminosidade, sempre com a finalidade de obter melhorcontraste de imagem. O diafragma do condensador regula a intensidade da luz que passa pelas lentes do microscópio. CUIDADOS A TER COM O MICROSCÓPIO  Não tocar com os dedos nas lentes do microscópio, pois os ácidos gordos da pele estragam as lentes;  Não usar lenços de papel ou de tecido na limpeza das lentes. Usar apenas o papel de limpeza adequado;  As preparações a fresco só devem ser observadasapós colocação da lamela sobre a amostra líquida;  As objectivas não devem tocar nas lâminas;  Não deixar a objectiva de imersão mergulhada no óleo;  No fim da aula deve-se limpar o óleo de imersão aderente à objectiva de 100x, com papel de limpeza adequado.  Cobrir o microscópio e não o colocar em locais com forte exposição solar, apos ter verificado que o microscópio está desligado....
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