Metodologia GRAM

Introdução
Com o inicio dos estudos em microbiologia, surgiram varias formas de se classificar os seres vivos, por exemplo, de acordo com a quantidade de envoltórios celulares, os seres foram classificados em procariontes e eucariontes. Os seres procariontes, as bactérias em particular, também são classificadas em diversas maneiras: conforme a morfologia, a forma do arranjo entre outros tipos de classificação. (TRABULSI&ALTERTHUM, 2008, pag. 7) Quanto a composição e características da parede celular, as bactérias podem ser classificadas como gram-positivas ou gram-negativas. Na maioria das bactérias gram-positivas a parede celular consiste em muitas camadas de peptideoglicanas, formando uma estrutura espessa e rígida, ricas em ácidos teicoicos (como glicerol, fosfato). (TORTORA,CASE& FANKE, 2012, pag. 85) A parede celular de gram-negativas consiste em uma ou poucas camadas de peptideoglicanas e uma membrana externa. A peptideoglicanas esta ligada a lipoproteínas na membrana externa, que é composta de lipoproteínas e fosfolipídios. Bactérias gram-negativas não possuem ácidos teicoicos (JAWETZ et. al. 2000, pag. 31)

OBJETIVO:
DESENVOLVER TECNICAS DE COLORAÇÃO GRAM, objetivando classificar as bactérias em gram-negativas e gram-positivas.
MATERIAL E METODOS:
1. Colher mucosa oral, colocar na lamina.
2. Submeter a lamina 3x na chama bico de busen.
3. Violeta de genciana
4. Lugol:
5. Lavar com álcool acetona e agua destilada
6. Corante fucsina
7. Lavar com agua destilada, escorrer e secar a lamina
8. Observar ao microscópio MO nas objetivas de 40x e 100x com oleo de imersao.

RESULTADOS E DISCURSSÕES

Inicialmente o esfregaço é fixado pelo calor, Segundo MOURA et al., o aquecimento serve para fixar e esfregaço e matar os microoganismos nele contido. (MOURA et. al.,2008, pag. 187)
O cristal violeta, no procedimento 3 atua como corante primário, , o Lugol é empregado posteriormente para reter o corante violeta de genciana, o I2 entra nas células