mestranda

Obtenção da enzima peroxidase

Rio Grande
2013

Sumário

1. INTRODUÇÃO

Os sistemas vivos são formados por uma enorme variedade de reações bioquímicas, e quase todas elas são mediadas por uma série de catalisadores biológicos conhecidos como enzimas. As enzimas aumentam a velocidade das reações químicas por meio da redução da barreira de energia livre que separa os reagentes dos produtos. As enzimas realizam esse processo por meio de vários mecanismos, os quais dependem do arranjo de grupos funcionais no sítio ativo da enzima, que é a região da enzima onde a catálise ocorre (VOET et al, 2006).
As peroxidases (PO) são um grupo de enzimas oxirredutases que oxidam substratos orgânicos, são capazes de catalisar um grande número de reações oxidativas em plantas usando peróxido como substrato, ou em alguns casos, oxigênio como um aceptor de hidrogênio. Em vegetais, a peroxidase induz a mudanças negativas de sabor durante a estocagem (FREITAS et al, 2008).
Enzimas classificadas como peroxidases, quando ativadas por peróxidos, são capazes de oxidar compostos contendo hidroxilas e nitrilas primárias ligadas ao anel aromático; isto é, substratos fenólicos e aminas aromáticas primárias. A reação de oxidação global ocorre em duas etapas sendo, a primeira, a de oxidação dos substratos da enzima formando radicais livres e, a segunda, a de polimerização espontânea resultante da alta instabilidade destes radicais (WILBERG, 2003).
O experimento tem como objetivo verificar as melhores condições de obtenção da enzima peroxidase, tais como meio extrator, pH e tipo de agitação, que será avaliado através da atividade (U/g de farelo) e da atividade específica da enzima (U/mg de proteína).

2. DESENVOLVIMENTO

2.1 MATERIAL E MÉTODOS

2.1.1 MATERIAL

Banho-Maria
Centrífuga
Espectrofotômetro
Bureta
Funil
Erlenmeyer
Algodão
Tubos de ensaio
Pipetas
Água destilada
Tampão fosfato 5 mM