IQB201 Aula 03 Tecnicas de Fracionamento de Aminoacidos 03 2011

IQB201 – Bioquímica Básica I

Técnicas de Fracionamento de
Aminoácidos
Joab Trajano Silva

Instituto de Química/UFRJ

Para que Servem as Técnicas de Fracionamento de Aminoácidos?

Para determinar os tipos e a abundância de cada aminoácido em um determinado tipo de alimento. Para determinar os tipos e a abundância de cada tipo de aminoácido no plasma sanguíneo, urina ou líquido céfalo-raquidiano.
Para determinar os tipos e a abundância de cadas tipo de aminoácido em meteoritos extraterrestres. Para determinar os tipos e a abundância de cada tipo de aminoácido em uma determinada proteína. As técnicas de fracionamento são baseadas nas diferenças de propriedades físico-quimicas existentes entre os aminoácidos.

Técnicas de Fracionamento de Aminoácidos

Cromatografia em papel. Nesta técnica, o principal fenômeno responsável pela separação das substâncias é o fenômeno de partição entre duas fases imiscíveis, formadas por uma mistura de um solvente pouco polar e um solvente polar.
Cromatografia de Troca Iônica. A cromatografia de troca iônica é um método de fracionamento baseado na fixação de substâncias carregadas a um suporte que contém uma carga oposta. A separação é possível por que as interações eletrostáticas são reversíveis e dependentes da afinidade de cada substância pelo trocador. Essa afinidade é função do pH do meio, da temperatura, da força iônica do tampão, etc.
Eletroforese. Esta técnica é baseada na migração de partículas (moléculas) carregadas, positivamente ou negativamente, quando sujeitas a ação de um campo elétrico.
Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Sistema moderno de cromatografia que utiliza a injeção das amostras e do solvente em colunas cromatográficas sob alta pressão.
Dependendo do tipo de coluna, pode realizar a separação de moléculas utilizando diferentes propriedades físico-químicas (partição, adsorção, troca iônica, etc).

Cromatografia de Partição em Papel

Uma grande variedade de técnicas modernas, tanto analíticas