Incompleto

Disponível somente no TrabalhosFeitos
  • Páginas : 3 (618 palavras )
  • Download(s) : 0
  • Publicado : 17 de novembro de 2011
Ler documento completo
Amostra do texto
Procedimento Operacional Padrão - POP
Dosagem de Proteínas

1. Materiais Necessários

Tubos de Ensaio;
Grade de tubos;
Água Destilada;
Estante para microtubos tipo Eppendorf (1,5 mL);Micropipetas com volume:
* 1 – 5 mL;
* 2 – 15 µL;
* 20 – 200 µL;
* 50 – 200 µL;
* 100 – 1000 µL.
Ponteiras;
Descarte (material para lavagem);
Cronômetro / Relógio;Espectrofotômetro + Cubeta (Plástico);
Reativos:
* Reativo A
30g Na2CO3 (Carbonato de Sódio)
+ 4g NaOH (Hidróxido de Sódio)
qsp 1.000 mL de Água Destilada;
* Reativo B
CuSO4 . 5H2O (Sulfatode Cobre Pentahidratado) a 2%;
* Reativo C
KNaC4H4O6·4H2O (Tartarato de Sódio a 4%).
Padrão de Albumina 20 mg/%;
Folin-Ciocalteu 1N
5 mL de Folin-Ciocalteu 2N + 5 mL de Água Destilada.2. Preparo da Bateria de Tubos

Para cada amostra identificar:
* 3 tubos para o Homogenato do Fígado (HF);
* 3 tubos para o Sangue Total (ST);
* 3 tubos para o Homogenato do Cérebro(HC);
* 3 tubos para o Padrão (Pd);
* 1 tubo para o Branco (Bco).

3. Preparo das Diluições

Grade para tubos;
Identificar 4 tubos:
* 1 tubo para HF (1:300);
* 1 tubo para ST(1:8);
* 1 tubo para Plasma (1:500);
* 1 tubo para HC (1:200).

Preparar diluições utilizando os tubos identicados acima:
Homogenato do Fígado (1:300)
5µL + 1,495 mL de águadestilada.
Sangue Total (1:8)
200µL + 1,4 mL de água destilada.
Plasma (1:500)
5µL + 2,495 mL de água destilada.
Homogenato do Cérebro (1:200)
5µL + 0,995 mL de águadestilada.

4. Preparo da Mistura Reativa (MR):

Para saber a quantidade necessária de Mistura Reativa utilize a fórmula:

Vn=QTb

Vn = Volume Necessário da MR (mL);
QTb = Soma da Quantidade deTubos das Baterias (un).

Para preparar a Mistura Reativa utilize a proporção (é importante seguir a ordem de solubilização - BCA):

MR = 0,2 mL do Reativo B + 0,2 mL do Reativo C + 20 mL do...
tracking img