HPLC

Cromatografia Líquida de Alta Pressão (HPLC)
A cromatografia é uma técnica analítica baseada na separação de componentes de misturas e identificação dos mesmos. Esta separação depende da diferença entre o comportamento dos analitos com a fase móvel e a fase estacionária. As moléculas presentes na amostra vão ter diferentes afinidades e interações com o suporte estacionário, o que conduz à separação das moléculas. Componentes que exibem forte interação com a fase estacionária irão mover-se mais lentamente através da coluna do que os componentes com mais fraca interação. Os compostos diferentes vão sendo separados à medida que avançam na coluna. A separação cromatográfica pode ser realizada utilizando uma variedade de fases estacionárias: placas de vidro de sílica
(cromatografia em camada fina), gases voláteis (cromatografia gasosa), papel
(cromatografia em papel) e líquidos (cromatografia líquida).
Cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) é um tipo de cromatografia líquida usada para separar os componentes de uma mistura, identificá-los, e para quantificar cada um desses componentes dissolvidos numa solução. Esta técnica é utilizada para determinar a quantidade de um composto específico numa solução. Por exemplo, pode ser utilizada HPLC para determinar a quantidade de morfina numa solução composta. O método consiste na existência de bombas (onde se geram pressões) e por onde passa um solvente líquido pressurizado que contém a mistura de amostra através de uma coluna cheia com um material adsorvente sólido. Cada componente na amostra interage de forma ligeiramente diferente com esse material adsorvente, causando diferentes taxas de fluxo para os diferentes componentes, o que leva à separação dos componentes à medida que fluem para fora da coluna. O componente ativo da coluna, o adsorvente, é tipicamente um material granular feito de partículas sólidas (por exemplo, sílica, polímeros, etc.) com micrómetros de tamanho. O líquido pressurizado é tipicamente uma