Graduação

Universidade Estadual do Sudoeste da Bahia – UESB
Departamento de Estudos Básicos e Instrumentais - DEBI

Coloração Gram

Bianca Souza Cana Verde – 201210649
Kérlen Sabrina Vieira Moreira – 201210216
Disciplina de Microbiologia Ambiental
Docente: Kátia Iro

Itapetinga – BA
Novembro de 2013

Introdução
A coloração de Gram é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838), em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina básica. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinação da morfologia e do tamanho das amostras analisadas.
O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não o fazem.
A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias. A técnica tem importância clínica uma vez que muitas das bactérias associadas a infecções são prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaços de pus ou de fluidos orgânicos.

Materiais Utilizados

Alça de Platina
Lamina de vidro
Bico de Bunsen

Reagentes
- Solução de cristal violeta 2%;
- Solução aquosa de iodo (lugol);
- Mistura álcool-acetona (descorante);
- Solução de fucsina;

Procedimentos
Retiraram-se duas lâminas de vidro de microscopia do recipiente e colocou uma gota de água estéril para auxiliar no esfregaço. Flambou a alça de platina, abrindo a Placa de Petri próxima da