Fluorimetria

Espectrofluorimetria

(Espectrofotometria de fluorescência)
“Fluorescência e concentração da solução” “Aplicação farmacêutica”

Aluna: Luciana A. A de Souza
Profº: Ari
RA: B40AIJ5
Farmácia/FM4P15

Conceito teórico
*Métodos qualitativos e quantitativos que se baseiam no fenômeno de excitação de uma molécula para, em seguida, ocorrer à emissão de uma radiação.
*A técnica envolve dois espectros de radiação:
-Excitação (menor )
-Emissão (maior )
Classificação

-Fluorescência excitação não provoca alterações no spin durante a transição eletrônica.
-Fosforescência: a excitação provoca alterações no spin durante a transição eletrônica.
-Quimiluminescência: emissão de radiação por uma espécie excitada durante uma reação química.
Vantagem

-Sensibilidade três vezes maior que as alcançadas em métodos espectrométricos (absorção molecular).
-Linearidade entre a intensidade de fluorescência e a concentração bem maior que a de métodos espectrofométricos.
Desvantagem

-Maior interferência (efeitos desativadores da luminescência).
-Correção através de procedimentos adequados de separação e purificação da amostra a ser analisada.

Estado Fundamental

-Excitação esta relacionada ao estado eletrônico do spin nas moléculas.
-Spin: Um orbital comporta, no máximo, dois elétrons de spin contrários (emparelhados).
↑↓ Em um orbital eletrônico no estado fundamental os elétrons se encontram Emparelhados como na figura.
Estados de Excitação

-Quando um par de elétrons de uma molécula é excitado a um nível de energia mais alto podem ser formados dois estados energéticos excitados:
°Singleto: elétrons permanecem emparelhados.
°Tripleto: elétrons desemparelhados.0
↓Estado excitado Singleto (Fluorescência)
↑
↑Estado excitado Tripleto (Fosforescência)
↑

Espectro de Excitação e Emissão

-Para efetuar uma análise fluorimétrica deve-se obter,