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A cromatografia líquida de alta eficiência é a técnica analítica de separação mais utilizada, por ser um método muito sensível capaz de determinações quantitativas, adequado para separações de espécies não-voláteis, espécies termicamente frágeis e por ser aplicável a diversas substâncias de interesse para a indústria, medicina, ciência, entre outros. Os materiais que podem ser analisados por este método são diversos, e entre estes estão: as proteínas, ácidos nucléicos, hidrocarbonetos, drogas, pesticidas, antibióticos, várias substâncias inorgânicas. Os componentes de um cromatógrafo líquido são: bomba, coluna cromatográfica, detector e o registrador. É um método utilizado para separação de espécies iônicas ou macromoléculas e compostos termolábeis.rias primas, testes de estabilidade e estudos de impurezas.
Vantagens da HPLC
-FE é utilizada inumeras vezes;
-Versatilidade:único requisito é a solubilidade na FM;
-Tempo reduzidode análise;
-Analise qualitativa:tr,espectro de absorção no UV;
-Analise quantitativa:desvios menores do que 5%
-Detectabilidade:absorção de UV
-Fluorescencia
-Automatização
Limitações da HPLC
-Alto custo do instrumento;
-Alto custo de mnutenção;
-Alto custo de operação;
-Falta de refração:baixa detectalididade,pouco estável;
-Necessidade de experiencia no seu manuseio.
A fase móvel da HPLC deve ser um solvente que respeite algumas características impostas por esse método analítico. A principal característica é que a fase móvel dissolva a amostra sem qualquer interação química entre ambas. Esta fase deve ter alto grau de pureza ou ser de fácil purificação, para que se possam fazer análises de alta sensibilidade, pois as impurezas podem interferir na detecção do analito por ultravioleta (UV). A fase móvel deve ser compatível com o detector empregado e, também possuir polaridade adequada para permitir uma separação conveniente dos componentes da amostra. Embora existam vários