Extração do dna cebola

EXTRAÇÃO DO DNA DA CEBOLA

CONCEITOS ESTUDADOS

Núcleo celular, cromossomos, DNA, solubilidades de membranas

OBJETIVOS

Promover a ruptura (física e química) das membranas celulares para a liberação do material genético;
Observar o desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas;
Realizar a separação do DNA dos demais componentes celulares.

MATERIAL UTILIZADO

Espátula
Faca
Béqueres de 250ml
Tubo de ensaio
Provetas de 50ml
Bastão de vidro
Funil de vidro
Suporte universal
Anel ou argola
Papel filtro
Banho maria 60° C
Cebola (Allium cepa) picada
Água filtrada
Detergente
NaCl (sal de cozinha)
Álcool etílico gelado
Gelo
PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL

· Com o auxílio de duas provetas, transfira 10ml de detergente e 20ml de água em um béquer de 250ml;

· Com o auxílio de uma espátula, coloque uma pitada de sal nesse mesmo béquer e agite com um bastão de vidro;
· Coloque a cebola picada nesse mesmo béquer (com a solução de lise-detergente), mexa bem e leve ao banho-maria por exatamente 15 minutos a 60°C;

· Resfrie a mistura do banho-maria, colocando o béquer no gelo por cerca de 5 minutos, mexendo periodicamente;

· Filtre a mistura, recolhendo o filtrado em um béquer limpo;

· Transfira pequenas quantidades do filtrado em tubos de ensaio limpos e secos;
· Adicione lentamente pela borda do tubo de ensaio o álcool etílico comercial gelado (aproximadamente o dobro do volume do filtrado). ATENÇÃO! ALCOOL É UM PRODUTO INFLAMÁVEL
· Espere alguns minutos. Bolhas irão se formar e as moléculas de DNA vão precipitar;
· Mergulhe o bastão de vidro no tubo de ensaio fazendo movimentos circulares cuidadosos.
OBSERVAÇÃO: Não mexer muito para as camadas não quebrarem as moléculas de DNA;
· Os “fios” esbranquiçados e grudentos formados são aglomerados de muitas moléculas de DNA e ficarão presos na ponta do bastão de vidro.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

01- Por que a cebola deve ser picada?