Extra O De DNA

Biologia Molecular I
Aula prática de extração de DNA de morango – 13/08/2013
Grupo de 4 alunos

Objetivos da aula prática:
- Obter ácido desoxirribonucléico (DNA) a partir de vegetais (morangos).
- Visualizar o DNA isolado.
Material:
• 3 morangos maduros
• 1 saco plástico para maceração dos morangos
• 1 colher de sopa
• 1 colher de chá
• 3 béquers (250 mL)
• sal de cozinha
• 1 frasco com detergente (sem cor)
• álcool comercial 98%
• 1 proveta contendo 150 mL de água destilada
• 1 peneira
• 2 tubos de ensaio grandes
• 1 bastão de vidro

Procedimento:
1 - Selecionar 3 morangos e tirar os seus cabinhos verdes.
2 - Colocar os morangos dentro de um saco plástico e macerá-los pressionando os morangos com os dedos até obter uma pasta quase homogênea. Transferir a pasta de morango para um copo.
3 - Em outro copo misturar 150 ml de água, uma colher (sopa) de detergente e uma colher (chá) de sal de NaCl. Misturar bem com o bastão de vidro, porém devagar para não fazer espuma.
4 - Colocar cerca de 1/3 da mistura de água, sal e detergente sobre o macerado de morango. Misturar levemente com o bastão de vidro.
5 - Incubar em temperatura ambiente por 30 minutos. Mexer de vez em quando com o mesmo bastão.
6 - Colocar uma peneira sobre um copo limpo e passar a mistura pela peneira para retirar os pedaços de morango que restaram.
7 - Colocar metade do líquido peneirado em um tubo de ensaio. Colocar apenas cerca de 3 dedos no fundo do tubo.
8 - Despejar delicadamente no tubo (pela parede do mesmo), sobre a solução, dois volumes de álcool comum. Não misturar o álcool com a solução. Aguardar cerca de 3 minutos para o DNA começar a precipitar na interfase.
9 - Usar um palito de vidro, plástico ou madeira para enrolar as moléculas de DNA. Gire o palito na interface entre a solução e o álcool.

Questões:
1. Por que é necessário macerar o morango?
2. Em que etapa do procedimento ocorre o rompimento das membranas das células do morango? Explique.
3. Qual a função do sal de cozinha?
4.