Experimento 3 – Desnaturação e Precipitação de Proteínas: Atividade Enzimática Presente no Suco do Abacaxi sobre Gelatina (Colágeno)

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Universidade Federal do ABC




Laboratório de Transformações Bioquímicas

Experimento 3 – Desnaturação e Precipitação de Proteínas: Atividade Enzimática Presente no Suco do Abacaxi sobre Gelatina (Colágeno)

Professor : Vani X. Oliveira Junior

Grupo: Ionah dos SantosMurilo S. Boscarino
Nathalia Levorato
Roger Preteroto



Santo André 2010
Resultados

1. Prepara uma tabela indicando os resultados observados de cadaexperimento.

Tabela 1: Resumo do procedimento experimental parte 1.
Reagentes
Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Tubo 4
água
2ml
 
 
 
amostra de abacaxi
 
2ml
 
 
amostra de abacaxi 60°C
 
 
2ml
 
amostra de abacaxi fervida
 
 
 
2ml
Gelatina
2ml
2ml
2ml
2ml

Tabela 2: Resultados das misturas da tabela 1.
Tubos
Resultados
Tubo 1
Solidificou
Tubo 2
Dissolveu e viroulíquido
Tubo 3
Dissolveu e virou líquido
Tubo 4
Solidificou

Parte 2: Precipitação de proteínas.

Tabela 3: Resumo do procedimento experimental parte 2.
Reagentes
Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
água
2ml
 
 
Sulfato de amônio
 
2ml
 
Etanol absoluto
 
 
2ml
Gelatina
2ml
2ml
2ml

Tabela 4: Resultados das misturas da tabela 3.
Tubos
Resultados
Tubo 1
Solidificou
Tubo 2Precipitou e formou uma bolinha branca na lateral
Tubo 3
Precipitou e formou uma massa branca no fundo
2. Tirar uma fotografia dos resultados para anexar ao relatório como figura.




3. Discutir o efeito do suco de abacaxi sobre o colágeno (gelatina).

No experimento realizado a gelatina, que serviu como modelo protéico de substrato, é um produto comercial obtido a partir da hidróliseparcial do colágeno, que por sua vez, é uma proteína presente em tecidos conjuntivos, como os tendões e as cartilagens, na matriz orgânica dos ossos e na córnea dos olhos. Quando hidratada, a gelatina forma uma estrutura definida como gel.
Os resultados obtidos após o experimento indicaram que as soluções de gelatina que continham suco de abacaxi, após serem resfriadas não apresentaram aspectode gel, fato explicado pela ação da enzima proteolítica Bromelina, que atua na quebra de ligações peptídicas da proteína observada (proteólise), causando a perda do processo de gelificação, impedindo que, mesmo hidratada e resfriada, formasse a estrutura de gel.
4. Discutir o efeito da temperatura sobre as enzimas (proteases) presentes no suco do abacaxi.

A enzima encontrada no abacaxi(bromelina) é classificada como proteases, que quando em temperatura ambiente ou a 60°C não encontra-se na forma desnaturada logo catalisam a clivagem hidrolítica de ligações peptídicas, causando a quebra das proteínas em peptídeos, quando essa quebra ocorre a proteína perde sua estrutura, propriedades e características (formação de materiais gelatinosos).
Quando a enzima encontra-se fervida temos suaforma desnaturada (provocada pelo aumento das vibrações dos átomos com o aquecimento), impedindo o processo de catálise. A proteína perde sua atividade biológica devido a perca total ou parcial da estrutura tridimensional.
Devido a isso a solução com o abacaxi fervido endurece pois temos a forma desnaturada da enzima e nas outras temperaturas fica líquido pois catalisam a clivagem hidrolítica deligações peptídicas.
5. Discutir o efeito do etanol e do sulfato de amônio sobre as proteínas em solução. Qual o princípio de cada efeito.

O efeito do etanol quando na gelatina é o aparecimento de precipitação. A precipitação é ocasionada pela desnaturação da proteínas, pois com a adição de etanol ocorre o rompimento das interações fracas.
Já o efeito do sulfato de amônio é turvação da...
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