Estudo da cinética da enzima invertase

Índice

Resumo pág. 3

Introdução teórica pág.4

Tratamento dos resultados pág.6

Conclusão pág. 10

Bibliografia pág. 11

Resumo
Usam-se diversas abordagens no estudo do mecanismo de acção de enzimas purificadas, mas a abordagem principal é determinar a taxa da reacção enzimática e como muda em resposta à mudança dos parâmetros experimentais, esta é conhecida como cinética enzimática. Neste trabalho experimental o objectivo era estudar a cinética da enzima invertase, ou seja, determinar o valor da velocidade máxima (máxima velocidade a que a enzima degrada o substrato) e determinar o valor do Km que é uma medida da afinidade enzimática para o substrato (essa afinidade é igual a 1/km). Se Km for elevado a afinidade é baixa. A invertase é uma enzima que catalisa a degradação da sacarose em glucose e frutose (Sacarose + H2O → Glucose + Frutose).
Inicialmente, recorreu-se ao método de DNS que, através de uma reta de calibração, permite calcular a concentração de açúcar invertido e observar como esta afeta a atividade enzimática. Obteve-se a absorvância e a concentração dos açúcares redutores (tendo-se feito cinco ensaios), de seguida calculou-se a velocidade de reação para cada concentração inicial de sacarose. Para se obter os valores usou-se a equação da reta Y= 1729,9x – 0,0178, em que Y é a absorvância. Em seguida colocaram-se estes resultados num gráfico (concentração de sacarose x velocidade de reação), obtendo-se uma curva de Michaelis-Menten. Esta curva é descrita pela equação que leva o mesmo nome. Apesar