eletroforese

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  • Publicado : 17 de setembro de 2014
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A eletroforese em gel é uma técnica usada para separar moléculas com tamanhos e cargas diferentes. Ela é bastante útil quando queremos analisar o tamanho das moléculas obtidas ou checar o resultadode uma amplificação de DNA.

Basicamente consiste em aplicar um gel que servirá como matriz (algo semelhante à um mingau de maisena) para separar diferentes moléculas através do seu pesomolecular por meio da aplicação de um campo elétrico. Cada mistura de DNA ou proteínas é colocada em poços diferentes do gel, e o gel é então colocado em placas de vidros que contém soluções tampões onde ésubmetido à diferença de potencial. Moléculas de pequeno peso molecular irão migrar para o pólo oposto mais rapidamente que moléculas maiores. Pense no emaranhado de cordas em que os menores conseguematingir o outro lado mais rapidamente, pois ficam menos retidos nos obstáculos formados à passagem.


Depois que a corrida das moléculas está terminada, gel é exposto á luz UV e os fragmentos sãovistos no gel em bandas, que correspondem a diferentes tamanhos dos fragmentos de moléculas utilizadas.

http://biointerativas.wordpress.com/2009/04/10/o-que-e-eletroforese/

*Bio interativaExistem duas variantes da técnica. Abaixo trataremos resumidamente:

Eletroforese para análise do DNA

O DNA apresenta uma carga essencialmente constante por unidade de massa, assim estas moléculaspodem ser separadas em géis de agarose ou de poliacrilamida em função somente de seu tamanho ou conformação espacial. Os géis são utilizados como matriz, por onde serão corridas as amostras comfragmentos de diferentes tamanhos, neste sentido os géis atuaram com “crivos moleculares”, impedindo o deslocamento das moléculas de um pólo ao outro da cuba de eletroforese. Quanto maior for a molécula maisdifícil será a passagem da mesma pelo emaranhado do gel. O procedimento para separar RNA e proteínas segue o mesmo princípio.

Eletroforese para análise de proteínas

A eletroforese também pode...
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