Dna recombinante e terapia genica

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  • Publicado : 24 de maio de 2012
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INTRODUÇÃO
Desde a elucidação da complexa estrutura da molécula de DNA, em 1953, segundo modelo proposto por Francis Crick e James Watson, a Ciência nunca mais foi a mesma. Mais tarde, em 1958, Crick relaciona o DNA, o RNA e as proteínas, salientando o fluxo unidirecional da informação, do DNA à proteína. Apesar destas descobertas e dos avanços obtidos, de acordo com Nascimento et al(2003) até o início da década de 70 o material genético dos organismos era o componente químico mais difícil de ser analisado, quando então começaram a surgir as primeiras técnicas de isolamento e purificação de genes específicos, através do processo de clonagem gênica.
Muitas dessas técnicas eram provenientes da Microbiologia, Bioquímica, Imunologia e Genética Microbiana e permitiram que amolécula de DNA ganhasse um novo enfoque. A partir daí tornaram o DNA mais fácil de ser analisado, possibilitando o isolamento de regiões específicas da molécula, obtê-las em grandes quantidades e determinar a sua seqüência numa velocidade de milhares de nucleotídeos por dia (NASCIMENTO et al, 2003; PIERCE, 2004).
Em conjunto, estas descobertas foram decisivas e de fundamental importância para osurgimento de uma nova área de pesquisa dentro do campo da Biologia: a Tecnologia do DNA Recombinante. Segundo Pierce (2004), a Tecnologia do DNA Recombinante, também chamada engenharia genética ou simplesmente biotecnologia, é um conjunto de técnicas para localizar, isolar, alterar e estudar segmentos de DNA. O termo recombinante é devido freqüentemente tais técnicas serem usadas para combinar omaterial genético de fontes distintas, tornando-o bem sugestivo.
Atualmente, são em grande número os objetivos práticos da pesquisa biotecnológica, desde a satisfação da curiosidade humana sobre a origem da vida ate ao controle e eliminação de doenças humanas, de outros animais e de plantas, enfim, à melhoria da qualidade de vida. Mesmo desconhecidos, ainda, os limites da aplicação práticada engenharia genética, sem dúvida agora dispomos de tecnologias para solução de problemas de natureza variada (CANDEIAS, 1991), as quais serão aqui discutidas e analisadas, sob a ótica de autores que são autoridades no assunto.


O DESENVOLVIMENTO DA TECNOLOGIA DO DNA RECOMBINANTE
Em última análise, a Tecnologia do DNA Recombinante consiste na técnica de reunião de DNAs derivados defontes biologicamente diferentes. De acordo com BURNS & BOTTINO (1991), o processo geral baseia-se em três enfoques experimentais principais:
1.Produção de fragmentos de DNA de fontes diferentes que contenham as seqüências gênicas de interesse;
2.Reunião desses segmentos em uma molécula de DNA capaz de se replicar, normalmente um plasmídeo bacteriano chamado vetor;
3.Transformação de célulasbacterianas com a molécula recombinante de modo que elas se repliquem e então se expressem.
O desenvolvimento desta nova tecnologia só foi possível pela descoberta, no final dos anos 1960, das enzimas ou endonucleases de restrição. Este tipo de enzima atua como uma espécie de "tesoura biológica" que, após reconhecer determinada seqüência nucleotídica, faz corte bifilamentar na ligaçãoaçúcar-fosfato da molécula de DNA, produzindo fragmentos. Elas são produzidas naturalmente por bactérias como forma de defesa contra infecção viral, onde clivam em diversos fragmentos o material genético dos vírus, impedindo sua reprodução na célula bacteriana. Em contrapartida, a bactéria protege seu próprio DNA dessa degradação, modificando sua seqüência de reconhecimento pela adição de grupos metila,fenômeno conhecido como metilação (PIERCE, 1994).
Interessante notar que cada bactéria tem suas próprias enzimas de restrição e cada enzima reconhece apenas um tipo de seqüência, independente da fonte de DNA. As enzimas de restrição são de vários tipos, dependendo da sua estrutura, da sua atividade e de seus sítios de reconhecimento e clivagem. Para a Tecnologia do DNA Recombinante as mais...
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